基于GC-MS、GC-FID技術的藥物質量控制與體內代謝研究應用.pdf

1、氣相色譜法適用于揮發(fā)性成分的分析，較液相色譜法其發(fā)展應用較早，商品化程度也高。通過聯(lián)用不同的分析技術和檢測器并發(fā)展不同的前處理方法，也使氣相色譜法的應用越來越廣。本課題基于GC-MS、GC-FID技術對三種藥物進行研究，為此技術在藥物質量控制與體內代謝的研究提供應用實例，具體研究內容如下:
　　一、富馬酸替諾福韋二吡呋酯中雜質的GC-MS/FID分析
　　采用GC-MS法對富馬酸替諾福韋二吡呋酯(TDF)中的揮發(fā)性雜質進行定

2、性分析，確定樣品有少量異丙醇殘留。在此基礎上，首次建立同時測定TDF中丙酮、異丙醇、二氯甲烷、異丙醚、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰胺、氯甲基異丙基碳酸酯和N-甲基吡咯烷酮八種有機溶劑的GC-FID測定方法。經(jīng)完整的方法學驗證，表明該方法可應用于TDF溶劑殘留量的檢測。八種溶劑均能完全分離，在考察的濃度范圍內，線性關系良好，R2=0.9990～0.9998;精密度RSD均小于3％，平均回收率為99.18％～101.87％。3批樣品中有機溶

3、劑殘留量均在規(guī)定的限度范圍內。結果表明該法靈敏、準確、可靠，可用于TDF中八種有機溶劑殘留量的檢測。
　　二、梔子厚樸湯揮發(fā)性成分的分析及其脂溶性成分提取方法的優(yōu)化
　　采用水蒸氣蒸餾法提取梔子厚樸湯、組方中的各單味藥及其藥對的揮發(fā)油，對揮發(fā)油中的成分進行GC-MS的定性分析及其相對含量的分析。共鑒定揮發(fā)油成分121個，在梔子、厚樸、枳實及梔子厚樸湯的揮發(fā)油中分別鑒定了57、68、41及82個成分。確定梔子厚樸湯揮發(fā)油的主要

4、成分包括D-檸檬烯、β-桉葉油醇、α-枝葉油醇和γ-桉葉油醇，占總揮發(fā)油的80.37％，表明這些成分是其揮發(fā)油的主要組成部分。
　　在此基礎上，首次采用加速溶劑萃取-分散液相微萃取(ASE-DLLME)技術應用于梔子厚樸湯有效成分的提取，通過單因素試驗和響應面設計法優(yōu)化加速溶劑萃取-分散液相微萃取方法，確定最佳ASE提取條件:以55％的乙醇，提取溫度為160℃，提取8min，循環(huán)一次。DLLME最佳萃取條件:樣品稀釋制成20％的乙

5、醇供試品溶液，100μL乙醇為分散劑，30μL二氯化碳為萃取劑。同時，在ASE-DLLME提取的梔子厚樸湯中共鑒定了61個成分，主要成分為厚樸酚(44.48％)、和厚樸酚(36.55％)，占總提取物的81.029％。與其他有機溶劑提取方法進行比較，ASE-DLLME技術在很大程度上減少了藥材中揮發(fā)性成分的損失，并有效地提取出藥材中的脂溶性成分，可為梔子厚樸湯脂溶性成分的研究提供技術支持。
　　三、速效救心丸揮發(fā)性成分及其代謝產(chǎn)物在

6、SD大鼠體內的血漿藥代動力學研究
　　利用GC-MS技術對速效救心丸入血成分進行分析，確定血漿樣品中含有樟腦、異龍腦和龍腦，其中樟腦是其在體內代謝得到的產(chǎn)物。進而建立了快速、靈敏的測定SD大鼠血漿樣品中這三種成分的測定方法。經(jīng)完整的方法學驗證，表明該方法能夠滿足臨床前藥代動力學研究中的技術要求，可用于樟腦、異龍腦、龍腦在SD大鼠體內的藥代動力學研究。應用已建立的方法首次測定SD大鼠舌下含服速效救心丸不同時間點三種成分的血藥濃度，明