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文檔簡(jiǎn)介
1、本試驗(yàn)主要研究加味麻杏石甘湯對(duì)人工感染傳染性支氣管炎病毒(IBV)雛雞的保護(hù)作用,并探討其可能的作用機(jī)制,為研究和開(kāi)發(fā)中藥防治該病提供新的思路和方法。
方法:IBV-M41標(biāo)準(zhǔn)毒株經(jīng)雞胚復(fù)壯傳代5次后測(cè)定其半數(shù)感染量,以100EID50為參照值,通過(guò)滴鼻、點(diǎn)眼的方法對(duì)15日齡雛雞進(jìn)行人工感染試驗(yàn)。接毒24h后,觀察雞的臨床表現(xiàn)并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。然后將200只15日齡雛雞隨機(jī)分為5組:正常組、陽(yáng)性對(duì)照組及加味麻杏石甘湯高、中
2、、低劑量組。除正常組外其余4組接種IBV尿囊液。藥物治療組于攻毒48h后分別以0.6%、0.4%、0.2%加味麻杏石甘湯進(jìn)行干預(yù),于雛雞18、21、24、27、30日齡時(shí),每組隨機(jī)取6只雞,無(wú)菌心臟采血,分離血清。分光光度法檢測(cè)各組雛雞血清中SOD、GSH-Px活力及MDA含量;ELISA方法檢測(cè)血清中 IFN-γ、IL-4及抗體水平。然后將雛雞處死,取肺、支氣管等組織做病理切片和病毒RNA的抽提。
結(jié)果:(1)給每只供試
3、雛雞滴鼻0.2mL100 EID50供試毒液,同時(shí)對(duì)雛雞進(jìn)行冷刺激,從攻毒后的雞只臨床癥狀、死亡雞只的剖檢病變、病料及病料增值尿囊液的致雞胚矮小化實(shí)驗(yàn)和RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果各方面說(shuō)明,本試驗(yàn)成功建立了雞傳染性支氣管炎模型;(2)加味麻杏石甘湯治療IB總有效率達(dá)90%~95%,治愈率為82.5%~87.5%;證實(shí)雛雞群應(yīng)用本藥治療此病效果顯著,飲服本藥的最適治療濃度為0.4%~0.6%;(3)與陽(yáng)性對(duì)照組相比,加味麻杏石甘湯通過(guò)促進(jìn)機(jī)體細(xì)
4、胞活化,導(dǎo)致組織迅速再生,改善IBV模型肺與支氣管組織的病理學(xué)變化;加味麻杏石甘湯對(duì)組織中IBV N基因的表達(dá)無(wú)明顯作用。(4)陽(yáng)性對(duì)照組雛雞血清中SOD、GSH-Px活力均比正常組明顯偏低,MDA含量顯著升高。藥物干預(yù)的各組血清中SOD、GSH-PX活力均明顯升高,MDA 含量降低。各藥物治療組之間,中藥高、中劑量組SOD、GSH-PX活力高于低劑量組,MDA 含量較之偏低;(5)IBV感染雛雞后,針對(duì)IBV感染的抗體生成滴度較低,尚
5、未形成對(duì)IBV有效的抵抗;血清IL-4含量升高,IFN-γ含量顯著降低,IFN-γ/IL-4的比值亦明顯降低,存在IFN-γ/IL-4失衡,即Th1/Th2細(xì)胞失衡,Th1和Th2 細(xì)胞因子的表達(dá)呈Th2 方向的偏移狀態(tài)。中藥組血清IBV抗體的滴度升高明顯,其中低劑量組抗體仍為陰性,而中高劑量組均為抗體陽(yáng)性。而且中藥組方可以降低血清中IL-4含量,升高IFN-γ含量,調(diào)節(jié)IBV導(dǎo)致的Th1/Th2功能失衡狀態(tài)。
結(jié)論:加味
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