慢性鉛中毒對大鼠腦組織的毒性作用.pdf

1、本研究從動物整體器官組織和細胞水平上，通過病理學與生理生化相結合的方法，較系統(tǒng)、全面地對鉛致海馬有關病理和機理進行探討。 從細胞水平上用MTT法檢測海馬神經(jīng)細胞存活率，不同濃度醋酸鉛(低、中和高濃度)分別作用24h后，0D570值降低逐漸明顯，呈現(xiàn)劑量和時間依賴關系；培養(yǎng)上清中乳酸脫氫酶釋放明顯增加(p<0.01)，膽堿酯酶活力明顯下降。尼氏體染色，HE染色和Giemsa染色發(fā)現(xiàn)鉛能使海馬神經(jīng)元表面粗糙、胞體變小、突起細小、回縮

2、，斷裂，甚至減少、出現(xiàn)裸核，細胞之間網(wǎng)絡疏松，胞體與胞漿之間界限逐漸模糊不清，且有劑量和時間依賴關系。激光掃描共聚焦顯微鏡定量分析海馬神經(jīng)元胞漿中游離Ca2+的平均熒光強度，鉛在一定濃度范圍和作用時間內使海馬神經(jīng)元細胞內Ca2+濃度明顯升高(p<0.01)，細胞內Ca2+濃度升高可能與鉛致海馬神經(jīng)元損傷和誘導其凋亡有重要關系。流式細胞儀檢測結果顯示各醋酸鉛組作用后細胞凋亡數(shù)量明顯升高(p<0.01)，且與染鉛劑量有很好的相關性。免疫細胞

3、化學染色發(fā)現(xiàn)低、中、高鉛組分別作用3d、6d、9d后，Bcl-2蛋白陽性的神經(jīng)細胞數(shù)目顯著降低，而Bax蛋白陽性的神經(jīng)細胞數(shù)目顯著增加；iNOS在隨著鉛濃度的增大，iNOS表達明顯增加；醋酸鉛可以促進大鼠海馬細胞中P53基因的表達，并有良好的劑量反應關系。 整體動物研究發(fā)現(xiàn)，飲用含鉛水0.5 g/L、1.0g/L和2.0 g/L(低、中和高鉛組)暴露1月、3月和6月后，各實驗組大鼠攝食量、飲水量逐漸減少，尤其是高鉛暴露組染毒3月

4、、6月時，平均總飲水量和平均總攝食量均顯著低于對照組(p<0.01)。各組血鉛水平均明顯高于對照組(p<0.01)， 2.0 g/L亞組的血鉛水平均明顯高于組內的0.5 g/L亞組(p<0.01)，隨染鉛時間的延長、濃度的增加，血鉛水平有所升高，但三組的組間血鉛水平相比均無明顯差異(p>0.05)。各組腦勻漿鉛水平均明顯高于對照組(p<0.05)。飲用高鉛水1月、3月、和6月后各組腦區(qū)尼氏體均有不同程度的減少，神經(jīng)元固縮，且與染毒時間和

5、劑量有關：免疫組織化學染色圖像分析發(fā)現(xiàn)，海馬區(qū)Bcl-2蛋白表達陽性神經(jīng)元細胞均隨染鉛劑量增大而減少，染色強度逐漸降低，平均灰度值逐漸增大；Bax蛋白則與Bcl-2蛋白相反。iNOS在鉛處理組大鼠海馬、皮層的表達明顯上升，隨染毒劑量增加，iNOS的表達明顯增加，有良好的劑量-反應關系。大鼠腦組織海馬P53表達陽性細胞數(shù)顯著增加，表達強度有升高趨勢：鉛誘導的神經(jīng)細胞凋亡與P53的表達呈正相關。 綜合上述研究結果，長期飲用高鉛水后大