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文檔簡介
1、目的:運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)技術(shù),檢測心肌組織中miR-133a的表達(dá)水平探討益氣養(yǎng)陰活血方對2型糖尿病大鼠心肌的保護(hù)作用。
方法:12周齡Wistar雄性大鼠60只,隨機(jī)選取空白組10只,2型糖尿病組50只。2型糖尿病組經(jīng)高糖高脂飼料聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)造模成功后隨機(jī)分為5組,即模型組、復(fù)方丹參滴丸(DSP)組和益氣養(yǎng)陰活血方高、中、低劑量組,每組10只。中藥組和DSP組分別進(jìn)行藥物干預(yù)5周,
2、空白組和模型組分別給予相應(yīng)劑量的生理鹽水。5周后處死,檢測各組空腹血糖(FBG)、體重(BW)及糖化血清蛋白(GSP)、血脂水平,取各組大鼠左室前壁心肌組織,一部分制成切片HE染色后光學(xué)顯微鏡觀察心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,另一部分運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)技術(shù)檢測心肌組織的miR-133a表達(dá)水平,采用單因素方差分析法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
結(jié)果:1造模成功:造模后糖尿病各組大鼠出現(xiàn)多飲、多食、多尿、體重減輕等癥狀,F(xiàn)BG≥
3、16.7mmol/L,符合2型糖尿病成模標(biāo)準(zhǔn)。2一般情況:實(shí)驗(yàn)期間,糖尿病組大鼠均出現(xiàn)各種代謝紊亂的癥狀,體重增加,活動減少,精神欠佳。中藥組及DSP組整體狀況均有改善,以中藥中劑量組最佳。3血糖(FBG)及糖化血清蛋白(GSP):造模后糖尿病各組大鼠FBG、GSP增高,與空白組比較有顯著差異(P<0.05)。用藥后,與模型組相比各藥物干預(yù)組FBG、GSP水平均降低;與DSP組比較中藥中、低劑量組FBG、GSP下降更明顯(P<0.05)
4、;中藥各組間比較中劑量組FBG、GSP低于高、低劑量組(P<0.05)。4血脂:與模型組比較各藥物干預(yù)組TC、TG、LDL明顯降低,HDL顯著升高(P<0.05);與DSP組比較各中藥組降TC、TG、LDL效果明顯,但二者對HDL作用無顯著差異(P>0.05);各中藥組之間比較中劑量組降TC、TG、LDL水平更明顯(P<0.05),但各組間HDL水平無顯著差異(P>0.05)。5心肌組織病理形態(tài)學(xué)觀察: HE染色后,光鏡下可見:正常的心
5、肌組織結(jié)構(gòu)清楚,心肌細(xì)胞排列整齊,呈短柱狀相互平行,細(xì)胞核橢圓形,位于中央;模型組心肌細(xì)胞排列疏松、紊亂,心肌細(xì)胞肥大,甚至變性,可見波浪狀改變,并可見心肌斷裂,細(xì)胞核大小不規(guī)則,心肌間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤;各治療組與模型組相比明顯好轉(zhuǎn),尤以中藥中劑量組改善明顯。6心肌組織miR-133a表達(dá)水平:與模型組相比,各治療組miR-133a表達(dá)水平均有不同程度的升高(P<0.05);與DSP組比較,各中藥組miR-133a表達(dá)水平略有升高(P<0
6、.05);各中藥組之間比較無顯著差異(P>0.05)。
結(jié)論:1益氣養(yǎng)陰活血方可改善2型糖尿病大鼠的糖脂代謝水平,減輕2型糖尿病大鼠心肌損傷。2研究發(fā)現(xiàn),益氣養(yǎng)陰活血方中劑量組在降糖調(diào)脂方面作用優(yōu)于高、低劑量組,提示我們在臨床實(shí)踐中應(yīng)重視藥物發(fā)揮作用的量效關(guān)系,以最合適的劑量達(dá)到最優(yōu)的治療效果。3益氣養(yǎng)陰活血方能夠提高糖尿病大鼠心肌miR-133a表達(dá)水平,抑制心肌細(xì)胞肥大,且作用優(yōu)于DSP,提示我們益氣養(yǎng)陰活血方對于2型糖尿
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