局部聯(lián)合應(yīng)用rhEGF、胰島素對(duì)糖尿病合并燒傷創(chuàng)面愈合影響的探索性研究.pdf

1、第一部分糖尿病合并燙傷大鼠模型的建立
　　 目的：建立Wistar大鼠糖尿病模型，在其體表制作出占其體表面積10％的深Ⅱ度燙傷。
　　 方法：采用STZ腹腔注射的方法制作糖尿病大鼠模型，采用控制熱水溫度以及燙傷時(shí)間的辦法來制作其深Ⅱ度燙傷模型。
　　 結(jié)果：制作的糖尿病大鼠模型血糖穩(wěn)定，濃度都大于16.7mmol/L，且出現(xiàn)糖尿病的癥候群，通過免疫組化及HE染色技術(shù)證明胰島細(xì)胞的分泌減少，部分細(xì)胞已經(jīng)被破壞。深Ⅱ

2、度燙傷模型制作可復(fù)制性強(qiáng)，HE染色證明皮膚表層被破壞，真皮下組織完整，殘留腺體的上皮細(xì)胞，形成有上皮小島。
　　 結(jié)論：與其他糖尿病模型制作方法比較，腹腔注射STZ具有重復(fù)性好，實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)單，操作方便，結(jié)果可靠，且操作過程易于量化和標(biāo)準(zhǔn)化，模型穩(wěn)定。控制熱水溫度和燙傷時(shí)間來制作深Ⅱ度燙傷有使用物品簡(jiǎn)單，過程易操作，重復(fù)性強(qiáng)，模型穩(wěn)定的優(yōu)點(diǎn)。
　　 第二部分局部聯(lián)合應(yīng)用胰島素和rhEGF在創(chuàng)面修復(fù)過程中對(duì)基質(zhì)及細(xì)胞因子的作

3、用
　　 目的：探討胰島素和rhEGF聯(lián)合應(yīng)用在糖尿病合并燒傷創(chuàng)面愈合的過程中對(duì)于基質(zhì)和細(xì)胞因子的作用，以及這些作用與創(chuàng)面愈合的關(guān)系。
　　 方法：①把制作好的糖尿病合并燙傷大鼠模型清創(chuàng)以后隨機(jī)分為四組，分別是：空白對(duì)照組(A組)，創(chuàng)面使用生理鹽水；胰島素組(B組)，創(chuàng)面應(yīng)用胰島素進(jìn)行局部浸潤注射；外噴rhEGF組(C組)，創(chuàng)面外噴適量rhEGF；胰島素和rhEGF聯(lián)合應(yīng)用組(D組)：創(chuàng)面應(yīng)用與胰島素組等劑量的胰島素局部

4、浸潤注射，并且外噴與rhEGF組同等劑量的rhEGF。用藥以后創(chuàng)面進(jìn)行包扎。②在創(chuàng)面愈合過程中不同時(shí)相點(diǎn)檢測(cè)OHP含量(樣本堿水解法)、TGFα含量(原位雜交)和VEGF含量(ELISA)。③在創(chuàng)面愈合過程中與上述相同的時(shí)相點(diǎn)，檢測(cè)各組創(chuàng)面愈合率以及VEGF的分布(抗VEGF抗體的免疫組化)。
　　 結(jié)果：①B組和C組不同時(shí)相點(diǎn)創(chuàng)面愈合率差異不大，D組創(chuàng)面愈合率在不同時(shí)相點(diǎn)都要高于其余三組。②B、C、D組OHP含量在不同時(shí)相點(diǎn)都

5、高于A組，且D組與B、C組在不同時(shí)相點(diǎn)都存在差異(P＜0.05)。③TGFα含量在B、C、D組都有適當(dāng)?shù)奶岣?，?duì)照組明顯低表達(dá)，D組在不同時(shí)相點(diǎn)的表達(dá)與B、C組有差異(P＜0.01)。④VEGF主要分布在血管內(nèi)皮細(xì)胞及創(chuàng)面基底部，D組在高水平維持時(shí)間較長，與B、C組之間存在差異(P＜0.05)，B、C、D組的維持水平濃度、峰值出現(xiàn)時(shí)間均優(yōu)于A組，B、C組間差異不甚明顯。
　　 結(jié)論：①在用胰島素控制局部血糖情況下，外用rhEGF

6、能明顯加速糖尿病燒傷創(chuàng)面愈合，這一方面可能是補(bǔ)充了創(chuàng)面本身刺激因子不足，另外一方面血糖的控制也能上調(diào)受體的表達(dá)，促進(jìn)愈合。②徹底地清創(chuàng)和包扎對(duì)于rhEGF可以增加其接觸時(shí)間，局部浸潤注射胰島素也減少其揮發(fā)，持續(xù)作用，為rhEGF發(fā)揮作用提供良好的環(huán)境。③聯(lián)合使用rhEGF和胰島素在糖尿病創(chuàng)面愈合過程中，可以協(xié)調(diào)調(diào)控創(chuàng)面愈合中膠原的代謝。④局部血糖控制后，rhEGF刺激可以增加其它細(xì)胞因子的表達(dá)，加速創(chuàng)面新生血管形成，再上皮化，早日封閉創(chuàng)