保留殘跡重建前交叉韌帶對(duì)移植物重塑影響的組織學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　 通過(guò)重建前交叉韌帶(ACL)動(dòng)物模型的建立,對(duì)比研究保留ACL殘跡與切除殘跡對(duì)移植物愈合與膠原表型的影響,并探討產(chǎn)生這些影響的原因,為臨床保留殘跡重建ACL的手術(shù)方法提供理論依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.實(shí)驗(yàn)處理:
　　 取36只成年新西蘭大白兔,其中4只做為正常對(duì)照組。其余32只為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,隨機(jī)分為4組,每組8只。切斷兔雙側(cè)ACL,左側(cè)保留ACL殘跡,右側(cè)不予保留,取同側(cè)自體跟腱作為移植

2、腱,行ACL重建術(shù)。分別于術(shù)后6、12、18、24周觀察膝關(guān)節(jié)功能并取材。
　　 2.觀察指標(biāo):
　　 2.1膝關(guān)節(jié)大體觀察評(píng)分:術(shù)后觀察膝關(guān)節(jié)主動(dòng)、被動(dòng)活動(dòng),關(guān)節(jié)穩(wěn)定性等情況。
　　 2.2組織學(xué)觀察:4組標(biāo)本分關(guān)節(jié)腔內(nèi)段和脛骨隧道內(nèi)段兩部分觀察。
　　 2.2.1關(guān)節(jié)腔內(nèi)段:4％多聚甲醛固定、包埋、切片后行HE染色、苦味酸-天狼猩紅染色及Ⅲ型膠原免疫熒光染色,觀察成纖維細(xì)胞密度、膠原表型及組織學(xué)情況。

3、
　　 2.2.2脛骨隧道內(nèi)段:10％EDTA-Na2脫鈣、包埋、切片后HE染色、甲苯胺藍(lán)染色,觀察腱-骨愈合情況。
　　 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.術(shù)后膝關(guān)節(jié)大體觀察評(píng)分:
　　 各時(shí)間段保留殘跡組膝關(guān)節(jié)大體觀察評(píng)分均高于切除殘跡組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);各處理組不同時(shí)間段間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);是否保留殘跡與時(shí)

4、間之間不存在交互作用(P＞0.05)。
　　 2.關(guān)節(jié)腔內(nèi)段:
　　 HE染色:各時(shí)間段保留殘跡組組織學(xué)表現(xiàn)均優(yōu)于切除殘跡組。各時(shí)間段保留殘跡組成纖維細(xì)胞密度均高于切除殘跡組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);各處理組不同時(shí)間段間比較,12周時(shí)均高于6、18、24周,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);是否保留殘跡與時(shí)間之間不存在交互作用(P＞0.05)。
　　 天狼猩紅染色:各時(shí)間段保留殘跡組Ⅲ型膠原所占Ⅰ、Ⅲ型

5、膠原纖維總面積的百分比均高于切除殘跡組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);各處理組不同時(shí)間段間比較,12周時(shí)均高于6、18、24周,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);24周時(shí)各處理組分別與正常跟腱比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),說(shuō)明移植腱需經(jīng)歷膠原塑形改建、重新“韌帶化”過(guò)程;24周時(shí)各處理組分別與正常ACL比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),說(shuō)明移植腱與正常ACL組織學(xué)存在差異,膠原塑形過(guò)程均未完成。
　　 Ⅲ型膠

6、原免疫熒光染色:各時(shí)間段保留殘跡組Ⅲ型膠原熒光表達(dá)量均高于切除殘跡組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);各處理組不同時(shí)間段間比較,12周時(shí)均高于6、18、24周,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);是否保留殘跡與時(shí)間之間不存在交互作用(P＞0.05)。
　　 3.脛骨隧道內(nèi)段:
　　 HE、甲苯胺藍(lán)染色:各時(shí)間段保留殘跡組移植腱與脛骨隧道間愈合的組織學(xué)表現(xiàn)、軟骨細(xì)胞的異染性均優(yōu)于切除殘跡組。切除殘跡組腱-骨愈合過(guò)程延遲于保