pTAC10參與調(diào)控?cái)M南芥PEP依賴的葉綠體基因表達(dá)的分子機(jī)理研究.pdf

1、染色體轉(zhuǎn)錄激活復(fù)合物(TAC)參與調(diào)控葉綠體基因的表達(dá)。擬南芥TAC復(fù)合物中約有35個(gè)成員，其中部分成員的功能尚不清楚。本文中研究的pTAC10蛋白質(zhì)是其中之一，具有S1結(jié)構(gòu)域和多個(gè)可能被磷酸化的位點(diǎn)。pTAC10是一個(gè)定位在葉綠體中的蛋白質(zhì)，其突變體為白化表型，且是幼苗致死。該基因的缺失導(dǎo)致了擬南芥葉綠體在發(fā)育的早期無(wú)法形成正常的類囊體，說(shuō)明該基因?qū)τ谌~綠體早期的發(fā)育是必需的。蛋白質(zhì)免疫實(shí)驗(yàn)表明，突變體中多數(shù)光合作用蛋白質(zhì)復(fù)合物的組分

2、缺失或積累明顯下調(diào)。實(shí)時(shí)定量RT-PCR和Northern雜交結(jié)果顯示，該突變體中PEP依賴的基因的表達(dá)明顯下調(diào)，這說(shuō)明該基因與質(zhì)體基因的表達(dá)相關(guān)。另外，通過酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)，我們找到了pTAC10蛋白在TAC復(fù)合物中的相互作用蛋白Trxz，并確定了pTAC10蛋白的有效相互作用區(qū)域。體外磷酸化實(shí)驗(yàn)證明pTAC10是酪氨酸蛋白激酶Ⅱ(CK2)的作用底物，部分磷酸化位點(diǎn)突變的互補(bǔ)植株呈現(xiàn)白化表型。綜上所述，pTAC10對(duì)葉綠體發(fā)育是必須的，