無創(chuàng)性延遲肢體缺血預(yù)適應(yīng)對心肌梗死大鼠預(yù)后的影響和預(yù)防心臟猝死作用的研究.pdf

1、目的：（1）研究無創(chuàng)性延遲遠(yuǎn)端肢體缺血預(yù)適應(yīng)（NDLIP）對動(dòng)物心肌梗死預(yù)后的心臟功能、心肌形態(tài)以及心肌代謝等方面的作用；（2）研究動(dòng)物心肌梗死后先實(shí)施NDLIP隨后運(yùn)動(dòng)對其預(yù)后的作用；（3）研究NDLIP對心臟猝死的預(yù)防作用。
　　方法：（1）取健康，體重250±10g的SD雄性大鼠45只，隨機(jī)分為3組，①心肌梗死（MI）組：手術(shù)結(jié)扎動(dòng)物L(fēng)AD，2W后成模；②無創(chuàng)性延遲遠(yuǎn)端肢體缺血預(yù)適應(yīng)（NDLIP）組：動(dòng)物心肌梗死模型成功后，

2、每隔1天進(jìn)行1次遠(yuǎn)端肢體缺血預(yù)適應(yīng)，直至4，6，8W；③假手術(shù)（Sham）組：作為陰性對照組，心臟LAD只穿線不結(jié)扎，不實(shí)施NDLIP；動(dòng)物常規(guī)飼養(yǎng)，于4，6，8W末，行心室插管，監(jiān)測血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，隨后腹主動(dòng)脈取血，ELISA法測定血清B細(xì)胞淋巴瘤因子2（Bcl-2）、Bcl-2關(guān)聯(lián)X蛋白（Bax）、磷酸激酶心型同工酶（CK-MB）、心肌肌鈣蛋白I（cTnI）；取左心室前壁，勻漿，ELISA法測定心肌組織線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、

3、Ⅳ。（2）取健康，體重250±10g的SD雄性大鼠60只，隨機(jī)分為4組，①-③組同（1）；④NDLIP+運(yùn)動(dòng)組：動(dòng)物心肌梗死模型成功后，每隔1天進(jìn)行1次遠(yuǎn)端肢體缺血預(yù)適應(yīng)，至第4，6，8W時(shí)大鼠進(jìn)行一定強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)，運(yùn)動(dòng)隔天1次，共1W；動(dòng)物常規(guī)飼養(yǎng)，于4，6，8W末，取左心室前壁，勻漿，ELISA法測定心肌組織三磷酸腺苷、一氧化氮合酶活性；取心尖，TUNEL法測定心肌細(xì)胞凋亡率。（3）取健康，體重250±10g的SD雄性大鼠30只，隨機(jī)

4、分為3組，分組同（1）；各組大鼠于4W末用重酒石酸間羥胺進(jìn)行猝死，記錄猝死過程中的ECG、猝死藥物累積量、猝死時(shí)間，于猝死末期腹主動(dòng)脈取血，ELISA法測定血清胱天蛋白酶3、熱休克蛋白70、超氧化物歧化酶活性。
　　結(jié)果：
　　1．NDLIP對動(dòng)物心肌梗死后，血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響
　　實(shí)施心肌梗死4，6，8W后，與MI組相比，NDLIP組血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)有所改善。左心室收縮壓（105.72±5.46，112.13±4.1

5、9和97.89±1.32 vs91.51±1.74，93.37±6.76和87.70±6.90 mmHg，P<0.05）顯著升高；左心室舒張末壓（16.98±5.59，16.21±5.24和16.32±5.63 vs29.35±5.40，26.51±5.02和23.46±4.95 mmHg，P<0.05）顯著降低。
　　2．NDLIP對動(dòng)物心肌梗死4，6，8W后線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的影響
　　與MI組比，實(shí)施心肌

6、梗死4，6，8W后，NDLIP組線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ（11.94±1.35，12.66±4.29和11.14±1.54 vs6.77±2.39，6.62±2.15和7.34±1.71 ng/ml，P<0.01），線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅱ（9.79±2.31，10.60±3.17和11.12±5.06 vs5.47±2.35，6.46±2.70和5.69±0.94 ng/ml，P<0.05），線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅲ（3.67±1.79，5.76

7、±1.79和3.94±1.36 vs1.61±0.51，3.55±1.67和2.38±0.37 ng/ml，P<0.05），線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅳ（2.08±0.59，2.73±1.04和3.04±1.39 vs1.37±0.25，1.69±0.44和1.50±0.31 ng/ml，P<0.05）水平都顯著升高。
　　3. NDLIP對動(dòng)物心肌梗死4W、6W、8W后Bcl-2、Bax表達(dá)的影響
　　與MI組比，實(shí)施心肌梗死4，

8、6，8W后，NDLIP組血清Bcl-2（126.85±17.78，121.84±13.85和185.35±18.12 vs318.65±61.98，367.53±50.38和410.53±51.08 pg/ml，P<0.01）水平顯著降低，Bax（162.47±21.37，263.24±18.77和224.09±39.27 vs113.85±10.57，145.82±35.64和134.43±21.34 pg/ml，P<0.05）水平顯

9、著升高。
　　4. NDLIP對動(dòng)物心肌梗死4，6，8W后CK-MB、cTnI的影響
　　與MI組相比，實(shí)施心肌梗死4，6，8W后，NDLIP組血清CK-MB（28.73±4.89，26.42±5.72和24.15±6.25 vs89.06±24.57，112.98±25.62和79.52±27.21 ng/ml，P<0.01）水平顯著降低，cTnI（3.39±0.70，2.98±0.32和3.25±0.73 vs6.32±

10、1.20，7.16±1.28和11.13±2.22 ng/ml，P<0.01）水平也顯著降低。
　　5.運(yùn)動(dòng)及NDLIP對動(dòng)物心肌梗死預(yù)后，TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡的影響
　　動(dòng)物實(shí)施心肌梗死后，先對其進(jìn)行NDLIP干預(yù)，隨后進(jìn)行一定強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)。與MI組相比，NDLIP組心肌凋亡指數(shù)（80.45±5.5870.00±4.73和76.43±4.91vs90.32±4.65，95.83±3.59和98.45±13.90％，P

11、<0.05）顯著降低，NDLIP+運(yùn)動(dòng)組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)（88.07±1.87，87.21±4.75和91.27±5.42 vs90.32±4.65，95.83±3.59和98.45±13.90%，P<0.05）也明顯降低，但NDLIP組降低更多，NDLIP組與NDLIP+運(yùn)動(dòng)組相比P<0.05。
　　6.運(yùn)動(dòng)及NDLIP對動(dòng)物心肌梗死預(yù)后，4，6，8W后心肌ATP水平的影響
　　動(dòng)物實(shí)施心肌梗死后，先對其進(jìn)行NDLIP干預(yù)

12、，隨后進(jìn)行一定強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)。與 MI組相比，NDLIP組 ATP（50.80±0.63，54.96±045和41.96±0.44 vs26.77±0.73，22.19±0.36和20.58±0.58ng/ml，P<0.01）水平顯著升高，NDLIP+運(yùn)動(dòng)組ATP（42.71±0.40，44.73±0.31和40.36±0.28 vs26.77±0.73，22.19±0.36和20.58±0.58 ng/ml，P<0.01）水平也顯著升高，

13、但NDLIP組升高更多，且兩組相比P<0.05。
　　7. NDLIP對動(dòng)物心肌梗死預(yù)后，4，6，8W后心肌NOS酶水平的影響
　　動(dòng)物實(shí)施心肌梗死后，先對其進(jìn)行NDLIP干預(yù)，隨后進(jìn)行一定強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)。與 MI組相比，NDLIP組 NOS（9.24±5.07，14.07±2.11和22.38±4.51 vs13.55±5.31，21.60±8.51和28.10±2.44 ng/ml，P<0.01）水平顯著降低，NDLIP+運(yùn)

14、動(dòng)組NOS（10.81±1.48，15.11±5.01和23.42±8.09 vs13.55±5.31，21.60±8.51和28.10±2.44 ng/ml，P<0.01）水平也顯著降低，但NDLIP組降低更多，且兩組相比P<0.05。
　　8. NDLIP對動(dòng)物猝死過程中心臟生理學(xué)、猝死時(shí)間、猝死藥物累積量的影響
　　重酒石酸間羥胺致動(dòng)物心臟猝死時(shí)，隨著給藥量的增加，動(dòng)物的心率是呈下降趨勢的，記錄了猝死前、給藥5、10、

15、30、50、70、90min時(shí)動(dòng)物的心率。與MI組相比，NDLIP組動(dòng)物猝死前心率（479±8 vs416±19 beat/min，P<0.01）明顯較高；NDLIP組給藥5、10、30、50min時(shí)動(dòng)物心率（446±32 vs370±20 beat/min，376±53 vs305±29 beat/min，307±63 vs244±33 beat/min，283±45 vs121±35 beat/min，P<0.01）明顯較高。與MI

16、組相比，NDLIP組動(dòng)物的致猝死藥物累積量、猝死時(shí)間（14.58±3.03 vs10.76±2.73 mg，105.4±3.9 vs53.8±13.6min，P<0.01）都顯著增加。
　　9. NDLIP預(yù)防心臟猝死，對Caspase-3、HSP70、SOD表達(dá)的影響
　　重酒石酸間羥胺致動(dòng)物心臟猝死時(shí)，與MI組相比，NDLIP組血清Caspase-3（2.01±0.52 vs2.34±0.38 ng/ml，P<0.01）

17、表達(dá)量顯著降低；HSP70（3.01±0.58 vs2.70±0.43 ng/ml，P<0.01）水平顯著升高；SOD（1.99±0.65 vs1.70±0.58 ng/ml，P<0.01）水平顯著升高。
　　結(jié)論：
　　1.大鼠心肌梗死后實(shí)施NDLIP可改善其血流動(dòng)力學(xué)，促進(jìn)線粒體呼吸功能，抑制細(xì)胞凋亡，從而起到改善預(yù)后的作用。
　　2.對于心肌梗死大鼠，先實(shí)施NDLIP然后進(jìn)行一定強(qiáng)度的運(yùn)動(dòng)對其預(yù)后也有一定的改善，