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文檔簡介
1、本文由生姜提取物抗氧化能力研究和石榴多酚在大孔樹脂上的吸脫附研究兩部分組成。
第一部分是對生姜提取物進行抗氧化性研究,包括部分提取物的制備,各種提取物對羥基自由基、超氧自由基、過氧化氫自由基清除效果的研究。生姜提取物包括兩個系列:超臨界CO2提取的姜油樹脂及其分離或提純物;溶劑萃取法得到的姜油樹脂及其分離或純化物。前一系列中的姜油樹脂、姜精油和純化物取自本實驗室前期的樣品,后一系列的全部樣品制備屬本文的研究內(nèi)容,包含溶劑提取、
2、萃取物粗分和大孔吸附樹脂柱層析純化的6-姜酚。
此部分的主要工作和結(jié)果依次為:
D4020大孔樹脂用于柱層析分離姜油樹脂中的6-姜酚。采用紫外分光光度法與HPLC法跟蹤檢測柱層析分離過程,探討了柱層析分離過程的工藝條件對6-姜酚分離效果的影響,最終確定的工藝條件為:柱高25cm,洗脫流速為1.0mL/min,上樣量100mL水相。將分離得到的純度較高的樣品進行二次柱純化,然后進行HPLC分析檢測。HPLC測試結(jié)果表明
3、:在上述工藝條件下純化后,6-姜酚峰面積百分?jǐn)?shù)提高到85.24%,6-姜酚的收集率為72.85%。
在上述工作的基礎(chǔ)上,對超臨界CO2萃取及溶劑萃取方式得到的兩系列多種提取物進行對羥基自由基、超氧自由基、過氧化氫的清除效果研究,并對其抗氧化能力進行比較。
首先通過實驗確定三種自由基的產(chǎn)生與檢測條件,實驗過程及結(jié)果如下。
羥基自由基由Fenton反應(yīng)產(chǎn)生,檢測方法為分光光度法。反應(yīng)條件為:亞反應(yīng)時間20min
4、,反應(yīng)pH為3.50,水浴溫度30℃。亞甲基藍(lán)檢測波長為670nm。
超氧自由基由鄰苯三酚自氧化反應(yīng)產(chǎn)生,檢測方法為紫外分光光度法。鄰苯三酚自氧化反應(yīng)檢測條件為:鄰苯三酚濃度1mmol/L,反應(yīng)時間17-18min,反應(yīng)溫度24℃,反應(yīng)體系pH8.40-8.50。半醌吸收峰320nm。
過氧化氫濃度檢測采用以玻碳-金修飾電極作為工作電極,飽和甘汞電極作為參比電極,鉑電極作為輔助電極的循環(huán)伏安法。在氧化峰電位0.39V
5、±0.01V處,過氧化氫濃度與電流呈線性關(guān)系,由此可得不同濃度過氧化氫對應(yīng)的電流值。
然后進行生姜提取物對上述三種自由基的清除實驗,結(jié)果表明:生姜提取物對三種自由基均有清除能力,部分提取物對羥基自由基、超氧自由基的清除率與濃度呈線性關(guān)系;含酚類物質(zhì)成分較多的提取物清除自由基能力強,即抗氧化能力強;含烯類物質(zhì)成分較多的提取物其清除自由基能力較差;純6-姜酚的抗氧化效果并不優(yōu)于酚類物質(zhì)為主的不純物,可能是由于提取物中除了6-姜酚外
6、還有其它物質(zhì)可以與自由基發(fā)生反應(yīng),或者這些物質(zhì)之間發(fā)生協(xié)同作用。
第二部分工作是對石榴皮中的石榴多酚在大孔吸附樹脂上的吸脫附進行研究。選擇HPD100、ADS-7及D101三種大孔吸附樹脂,研究了石榴多酚在大孔樹脂上的吸附等溫線、吸附動力學(xué)特征。實驗結(jié)論如下:
石榴多酚在HPD100、ADS-7及D101三種大孔樹脂上的吸附等溫線符合Freundlich方程,n分別為1.51,0.681,0.648。
石榴
7、多酚在三種樹脂上的吸附動力學(xué)模型為:顆粒擴散動力學(xué)模型能比較真實的反映HPD100大孔樹脂對石榴多酚的吸附過程,石榴多酚在ADS-7和D101上的吸附動力學(xué)行為均符合二級動力學(xué)方程。由模擬方程計算的單位質(zhì)量樹脂平衡吸附量依次為11.84mg/g,11.37mg/g,8.13mg/g,實驗結(jié)果依次為12.09mg/g,11.20mg/g,7.93mg/g,兩者非常接近。
結(jié)果表明:HPD100大孔樹脂對石榴多酚的吸附優(yōu)于ADS-
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