逍遙散拆方藥隊(duì)的抗抑郁作用及其5-HT-BDNF機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察逍遙散拆方藥隊(duì)抗抑郁作用的最佳比例及其對CUMS模型小鼠、谷氨酸所致海馬神經(jīng)元細(xì)胞毒性的影響，揭示該拆方藥組的抗抑郁作用及5-HT/BDNF通路的初步機(jī)制。
　　方法：⑴應(yīng)用均勻設(shè)計(jì)方法將柴胡、當(dāng)歸、薄荷、白芍四味藥物設(shè)計(jì)成1、2、3、4、5個(gè)比例組（10.2g/kg、17.55g/kg、12.675g/kg、18.3g/kg、6.825g/kg），觀察不同比例組對小鼠懸尾、游泳試驗(yàn)不動時(shí)間的影響，并結(jié)合數(shù)學(xué)回歸計(jì)算方法

2、篩選出抗抑郁作用的最佳配伍比例，進(jìn)一步篩選薄荷用量，以獲得可作為后續(xù)研究的拆方藥隊(duì)（柴當(dāng)薄組）。⑵慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激+孤養(yǎng)6周制備CUMS小鼠抑郁模型觀察最佳比例組的抗抑郁作用，造模第3周逍遙散全方（30g/kg）、柴當(dāng)薄組（16.43g/kg、21.90g/kg）、阿米替林（10mg/kg）開始灌胃給藥，連續(xù)4周，以小鼠體重、自主活動量、糖水偏愛百分比、空間記憶探索能力等行為學(xué)指標(biāo)評價(jià)抗抑郁作用，ELISA法測定模型小鼠血清BDNF

3、、5-HT水平及海馬部位5-HT含量。⑶采用8-OH-DPAT（5-HT1A受體激動劑）、DOI（5-HT2A受體激動劑）引起小鼠行為學(xué)變化的實(shí)驗(yàn)，探討該拆方藥隊(duì)對5-HT1A/2A受體的影響。⑷谷氨酸誘導(dǎo)大鼠原代海馬神經(jīng)細(xì)胞毒性，觀察拆方藥隊(duì)含藥血清對神經(jīng)細(xì)胞毒性的保護(hù)作用，ELISA法測定細(xì)胞上清液中BDNF、5-HT含量。
　　結(jié)果：⑴逍遙散拆方藥隊(duì)比例1（10.2g/kg）顯著縮短小鼠懸尾、游泳不動時(shí)間，并對正常動物自主活

4、動量無影響；其余比例對小鼠懸尾、游泳不動時(shí)間無影響，比例1的基礎(chǔ)上確定了由柴胡、當(dāng)歸、薄荷組成的組方，作為逍遙散的拆方藥隊(duì)用于后續(xù)研究。⑵與模型對照組比較，逍遙散拆方藥隊(duì)（柴當(dāng)薄組）16.43g/kg、21.9g/kg劑量均顯著提高CUMS模型小鼠的自主活動、糖水消耗量（P<0.01），明顯縮短水迷宮測試中定位航行的潛伏期（P<0.05）；逍遙散拆方藥隊(duì)16.43g/kg顯著增加空間探索實(shí)驗(yàn)時(shí)目標(biāo)象限運(yùn)動距離及有效區(qū)域進(jìn)入次數(shù)（P<0.

5、01）。逍遙散拆方藥隊(duì)16.43g/kg、21.9g/kg顯著增加模型小鼠血清BDNF、5-HT含量及海馬部位5-HT水平。⑶逍遙散拆方藥隊(duì)16.43g/kg、21.9g/kg顯著對抗DOI所致的小鼠甩頭反應(yīng)；21.9g/kg對8-OH-DPAT引起的小鼠5-HT樣行為表現(xiàn)出明顯協(xié)同作用。⑷MTT法顯示逍遙散拆方藥隊(duì)含藥血清能升高谷氨酸誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)細(xì)胞毒性模型細(xì)胞的OD值，降低細(xì)胞上清液中LDH活力，3％、4.8%濃度的含藥血清顯著升

6、高損傷細(xì)胞上清液中BDNF含量（P<0.05），3%濃度的含藥血清對細(xì)胞上清液中5-HT水平有顯著升高作用（P<0.05）。
　　結(jié)論：由柴胡、當(dāng)歸、薄荷組成的逍遙散拆方藥隊(duì)（柴當(dāng)薄組）具有抗抑郁作用，對應(yīng)激抑郁模型小鼠及CUMS抑郁模型小鼠的行為學(xué)有改善作用。其抗抑郁作用的發(fā)揮與提高CUMS抑郁模型小鼠血清BDNF，及血清與海馬部位5-HT水平相關(guān)，其對5-HT系統(tǒng)的影響可能與激動5-HT1A受體、拮抗5-HT2A受體有關(guān)。該拆