苯并三氮唑類和二苯甲酮類紫外線吸收劑對雄激素受體的干擾效應(yīng).pdf

1、在人們的日常生活及生產(chǎn)中，有機紫外線吸收劑被大量而廣泛地使用，目前已在多種環(huán)境介質(zhì)和生物樣本中檢測到它們的殘留，關(guān)于其潛在的生物毒性和健康風(fēng)險逐漸引起高度關(guān)注。本文選取兩類常用的有機紫外線吸收劑——苯并三氮唑類(benzotriazoles，BZTs)和二苯甲酮類(benzophenones，BPs)——為主要研究對象，利用重組人雄激素受體基因酵母研究了其對雄激素受體(androgenreceptor, AR)的干擾效應(yīng);采用人肝微粒體

2、(human liver microsome，HLM)和人細(xì)胞色素CYP3A4(cytochrome P3A4，CYP3A4)酶，考察了P450酶介導(dǎo)的代謝對這兩類紫外線吸收劑AR干擾效應(yīng)的影響，并對其代謝產(chǎn)物采用四級桿-飛行時間質(zhì)譜并結(jié)合密度泛函理論(density functional theory, DFT)進行了鑒定。主要實驗結(jié)果如下：
　　(1)研究了八種典型BZTs(1HBT、UV-P、UV-234、 UV-326、U

3、V-327、UV-328、UV-329、UV-350)對AR的激活或拮抗作用。八種BZTs均未表現(xiàn)AR激活效應(yīng)。然而UV-P具有顯著的AR拮抗效應(yīng)，并存在顯著劑量-效應(yīng)關(guān)系(IC50=22.13μM)。另外七種BZTs在低實驗濃度下無拮抗效應(yīng)，但在較高濃度(500μM)下UV-234、UV-327、UV-328、UV-329、UV-350具有較弱AR拮抗效應(yīng)。經(jīng)過HLM或CYP3A4代謝后發(fā)現(xiàn)UV-P存在代謝解毒現(xiàn)象，而UV-328表現(xiàn)

4、為顯著的代謝激活，另外六種BZTs代謝前后的AR拮抗效應(yīng)無明顯差異。對UV-328的代謝產(chǎn)物通過QTOF進行了產(chǎn)物鑒定，發(fā)現(xiàn)主要代謝產(chǎn)物為一次羥基化產(chǎn)物，并存在少量二次羥化產(chǎn)物。采用DFT預(yù)測了主要代謝位點;
　　(2)研究了六種典型BPs（BP-1、BP-2、BP-3、BP-4、BP-8、4HBP）對AR的干擾效應(yīng)。六種BPs均未有AR激活效應(yīng)，但BP-4、BP-8具有顯著的AR拮抗效應(yīng)且有顯著劑量-效應(yīng)關(guān)系（IC50分別為10

5、.37μM和5.54μM）。BP-3只在較高濃度下對AR有一定的拮抗毒性，用HLM代謝后其AR拮抗毒性顯著減弱，另外三種BPs(BP-2、BP-4、4HBP)代謝前后的AR拮抗效應(yīng)無明顯差異。
　　綜上，本研究發(fā)現(xiàn)UV-P、BP-4、BP-8具有較強的AR拮抗效應(yīng)，且其毒性強弱順序為:BP-8＞BP-4＞UV-P;經(jīng)HLM或人CYP3A4酶體外代謝后，UV-P、BP-3代謝后AR拮抗效應(yīng)減弱，而UV-328代謝的AR拮抗效應(yīng)顯著增