二甲雙胍對db-db小鼠糖尿病腎病的治療作用及機制.pdf

1、目前全球糖尿病患者是一支龐大的隊伍，此慢性病治愈率低病程漫長，并發(fā)癥多，患者生活質(zhì)量下降，甚至喪失勞動能力。其較常見較嚴重的并發(fā)癥是糖尿病腎病。糖尿病腎病發(fā)病較隱匿，在疾病的早期階段患者尿中可出現(xiàn)微量白蛋白，癥狀不易察覺，疾病終末階段可表現(xiàn)為大量蛋白尿。繼而導致腎小球硬化及腎臟纖維化，最終導致腎臟衰竭。但是目前對糖尿病腎病仍缺乏明顯有效的治療手段，臨床以對癥治療為主，如降低腎小球高濾過率、降低尿蛋白等。
　　二甲雙胍是控制糖尿病高

2、血糖狀態(tài)的雙胍類降糖藥。此藥在臨床應用時間久，安全性高。二甲雙胍通過減少肝臟糖原輸出和增加機體對胰島素敏感性等降低血糖，減低患者體重，減低外周組織對胰島素的抵抗，二甲雙胍能否治療糖尿病腎病，在臨床還未明確。
　　近年來越來越多的研究表明，氧化應激增強以及活性氧產(chǎn)生過多與糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展有密切聯(lián)系。腎小管上皮細胞可通過上皮細胞轉(zhuǎn)分化成為肌成纖維細胞進入間質(zhì)，合成細胞外基質(zhì)，直接導致腎纖維化，其也是參與糖尿病腎病發(fā)展的一個明確機制

3、。本研究以db/db糖尿病腎病小鼠為模型，觀察二甲雙胍能否通過抑制腎臟的氧化應激和上皮細胞間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化過程緩解糖尿病腎病的病情。
　　目的:
　　以db/db糖尿病腎病小鼠為模型，觀察二甲雙胍干預后對糖尿病腎病的影響，并深入揭示其作用機制。
　　方法:
　　15只均為8周的雌性小鼠，10只C57BL/KsJ db/db小鼠，5只C57BL/KsJdb/m小鼠。在同樣的環(huán)境中分籠喂養(yǎng)一周。其中5只db/m小鼠為正常

4、對照組，將10只db/db小鼠每組5只隨機平均分為模型組和二甲雙胍治療組。以二甲雙胍（溶于0.5％生理鹽水）0.0042g/(kg·d)的劑量給治療組小鼠灌胃，對照組給以相同劑量的生理鹽水灌胃，連續(xù)給藥12周。給藥結束后，處死三組小鼠，稱體重、腎重，用代謝籠收集24h尿標本檢測尿微量白蛋白量，采血檢測血糖、尿素氮和肌酐，留取腎組織行PAS和MASSON染色，試劑盒檢測氧化應激指標SOD、CAT和MDA的含量，Western blot蛋白

5、電泳方法檢測各組腎臟蛋白混合液中E-cadherin和α-SMA的表達。
　　結果:
　　(1) db/db模型組和二甲雙胍治療組小鼠初始腎重、體重無差異，二甲雙胍治療后均有下降趨勢但仍高于正常組;db/db模型組和二甲雙胍治療組小鼠腎重/體重指數(shù)無顯著差異。
　　(2) db/db模型組和二甲雙胍治療組小鼠血糖水平無顯著差異，但較正常組小鼠有明顯升高;與正常組小鼠相比，db/db模型組小鼠血尿素氮和肌酐、24小時尿微

6、量白蛋白水平均明顯升高，二甲雙胍治療后較模型組有明顯下降。
　　(3)與正常組小鼠相比，腎臟PAS和MASSON染色結果示db/db模型組小鼠腎小球肥大，毛細血管基底膜增厚，系膜區(qū)面積增寬，包括系膜細胞增生和系膜基質(zhì)增多，腎間質(zhì)膠原纖維含量增多;二甲雙胍治療組小鼠腎臟上述病理改變較db/db模型組有不同程度的減輕。
　　(4)與正常組小鼠相比，SOD和CAT的活性在db/db模型組明顯降低，而MDA的表達明顯較正常對照組高。

7、二甲雙胍干預后的db/db模型組小鼠腎臟中SOD和CAT活性明顯升高，而MDA的表達明顯降低。
　　(5)與正常組小鼠相比，db/db小鼠腎臟上皮表型標志分子E-cadherin表達水平明顯降低，而間質(zhì)表型分子α-SMA表達增高，二甲雙胍治療后db/db小鼠腎臟上皮表型標志分子E-cadherin表達明顯升高，而間質(zhì)表型分子α-SMA表達明顯降低。
　　結論:
　　二甲雙胍明顯減輕了db/db模型組小鼠的腎小球硬化及腎