經(jīng)皮腎鏡術(shù)后尿膿毒血癥的機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　1.探尋經(jīng)皮腎鏡術(shù)（PNL）后尿膿毒血癥的高危因素，為預(yù)測(cè)尿膿毒血癥提供依據(jù)。
　　2.建立豬的腎盂灌注模型，通過(guò)抑制灌注液中HMGB1或加入重組HMGB1，分析HMGB1/TLR4在PNL引發(fā)的炎癥反應(yīng)中的作用，并抑制TLR4驗(yàn)證HMGB1通過(guò)TLR4信號(hào)通路參與PNL引發(fā)的炎癥反應(yīng)。
　　3.建立豬的腎盂灌注模型，通過(guò)不同腎盂灌注流速，評(píng)估腔內(nèi)灌注不同濃度維拉帕米對(duì)腎盂壓力的影響，及其對(duì)全身系統(tǒng)有無(wú)副作

2、用。
　　方法：
　　1.分析行PNL術(shù)患者293例，根據(jù)患者術(shù)后是否存在全身炎癥反應(yīng)綜合征（SIRS）分為SIRS組和對(duì)照組。比較兩組患者性別，年齡，糖尿病史，高血壓史，結(jié)石相關(guān)發(fā)熱史，患側(cè)結(jié)石手術(shù)史，腎積水程度，結(jié)石大小，術(shù)前尿培養(yǎng)，尿白細(xì)胞，血白細(xì)胞計(jì)數(shù)，中性粒細(xì)胞比例，肌酐，C反應(yīng)蛋白，降鈣素原，白介素6，手術(shù)時(shí)間，結(jié)石殘留等因素是否存在差異。
　　2.建立腎盂灌注模型，分別用生理鹽水，含HMGB1中和抗體的灌

3、注液，含重組HMGB1的灌注液，在150 mmHg壓力下持續(xù)灌注30 min。qRT-PCR檢測(cè)腎組織HMGB1 mRNA水平表達(dá)；Western blot或免疫組化檢測(cè)蛋白水平表達(dá)；qRT-PCR檢測(cè)腎組織TLR4 mRNA水平表達(dá)，并采集血液用于血清炎性因子的檢測(cè)。
　　3.建立腎盂灌注模型，用不同灌注流速(0,2,4,6,8,10,14和20 ml/min)以及灌注不同濃度的維拉帕米(0,0.1,1,10和100 ug/ml

4、)監(jiān)測(cè)術(shù)中腎盂壓力變化。
　　結(jié)果：
　　1.84名患者術(shù)后出現(xiàn)SIRS，女性患者（p=0.028），存在結(jié)石相關(guān)發(fā)熱史（p<0.001），患側(cè)結(jié)石手術(shù)史（p=0.029），結(jié)石體積大（p<0.001），術(shù)前尿培養(yǎng)陽(yáng)性（p=0.041），尿白細(xì)胞陽(yáng)性（p=0.007），血清C反應(yīng)蛋白升高（p=0.011），降鈣素原水平升高（p<0.001），手術(shù)時(shí)間長(zhǎng)（p=0.044），存在結(jié)石殘留（p=0.029）是PNL術(shù)后潛在尿膿毒血

5、癥的高危因素。其中結(jié)石相關(guān)發(fā)熱病史（p<0.001），結(jié)石體積大（p<0.001）以及血清降鈣素原水平升高（p=0.024）是PNL術(shù)后潛在尿膿毒血癥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　2.腎盂灌注后，HMGB1蛋白表達(dá)和mRNA表達(dá)水平上升，TLR4表達(dá)增加；抑制HMGB1能夠減輕灌注導(dǎo)致的炎性因子表達(dá)，并減少灌注導(dǎo)致的中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)；而rHMGB1處理能促進(jìn)灌注導(dǎo)致的炎性因子表達(dá)，并加重灌注導(dǎo)致的中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)；抑制HM

6、GB1可以抑制TLR4/MyD88信號(hào)分子表達(dá)，而rHMGB1處理增強(qiáng)TLR4/MyD88信號(hào)分子表達(dá)。
　　3.用1,10和100 ug/ml濃度的維拉帕米灌注時(shí)能減少腎盂壓力升高，且血壓及心率均不受影響。而用0.1 ug/ml濃度的維拉帕米灌注時(shí)不能減少腎盂壓力升高。
　　結(jié)論：
　　1.結(jié)石相關(guān)發(fā)熱病史，結(jié)石體積大以及降鈣素原水平升高是PNL術(shù)后潛在尿膿毒血癥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。
　　2.HMGB1/TLR4信