冰溫?；顥l件下縊蟶優(yōu)勢腐敗菌生長動力學及耐冷機制研究.pdf

1、本研究主要以縊蟶為實驗對象，綜合分析了生態(tài)冰溫?；罴夹g對縊蟶新鮮度品質的影響，應用Illumina Miseq高通量測序的方法研究了縊蟶冰溫?；钸^程中菌相動態(tài)變化，并以鑒定得到的優(yōu)勢腐敗菌——假單胞菌(Pseudomonas spp.)為研究對象，建立和驗證了不同溫度條件下假單胞菌的生長動力學模型。應用iTRAQ結合多維液相色譜串聯質譜技術（2D LC-MS/MS）分析了冰溫?；钸^程中縊蟶蛋白質組變化，通過生物信息學分析，對與縊蟶耐冷機

2、制密切相關的蛋白和通路進行了篩選。主要結果如下:
　　1.縊蟶的生態(tài)冰溫區(qū)約為-1.9～1.5℃，此溫度區(qū)間可應用于縊蟶的?；钛芯?，-1.5℃溫度條件下冰溫?；羁蓪⒖O蟶的?；钇谘娱L至11d。分別從感官評價、理化評價和微生物評價等方面，研究不同?；顪囟龋?1.5、10、20℃）對于縊蟶新鮮度品質的影響。結果表明:-1.5℃冰溫?；羁O蟶效果最好，能夠客觀評價縊蟶新鮮度品質的主要指標是感官評分、TVB-N、K'值、質構（硬度、彈性、粘性

3、）和細菌總數，pH值可以作為評價縊蟶品質的一個參考指標。
　　2.縊蟶初始菌相中，優(yōu)勢菌為弓形桿菌（Arcobacter spp.）、擬桿菌科未分類屬和Psychrilyobacter spp.，比例分別為16.2％、8.4％和7.2％。?；钇诮K點時，假單胞菌數目明顯增多，成為優(yōu)勢腐敗菌，所占比例為26.2％。次優(yōu)勢菌為弧菌科未分類屬、嗜冷單胞菌（Psychromonas spp.）、弓形桿菌和Psychrilyobacter s

4、pp.，比例分別為17.8％、14.4％、13％和11.8％。修正的Gompertz模型能夠有效擬合低溫(-1.5～15.0℃)條件下假單胞菌的生長，所得的相關系數R2均在0.98以上，偏差度和準確度均在可接受范圍之內。采用平方根模型擬合溫度與最大比生長速率μmax、溫度與延滯時間λ的關系，相關系數R2分別為0.963和0.970，線性關系良好，建立的Gompertz模型可對-1.5～15.0℃溫度范圍內假單胞菌的生長進行預測。

5、　　3.iTRAQ共鑒定得到縊蟶冰溫?；钪胁町惐磉_蛋白27種，其中上調蛋白4種，下調蛋白23種。對差異表達蛋白進行GO功能分類，發(fā)現其主要與縊蟶的能量代謝、應激反應、DNA復制和蛋白質合成有關。對差異表達蛋白進行KEGG通路富集分析，發(fā)現其顯著富集的通路為MAPK信號通路、卵母細胞減數分裂和長時程增強。篩選得到的可能與冰溫縊蟶耐冷機制相關的通路有:MAPK信號通路、氧化磷酸化、TCA循環(huán)、鈣信號通路、淀粉和蔗糖代謝、氨基糖和核苷酸糖代謝