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文檔簡(jiǎn)介
1、以番鴨作為實(shí)驗(yàn)樣本,采用cDNA-AFLP技術(shù),利用64對(duì)cDNA-AFLP引物對(duì)番鴨就巢期和非就巢期之間的多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè),篩選差異表達(dá)基因。并采用候選基因法,以GnRH、GH和FSH三個(gè)基因進(jìn)行番鴨產(chǎn)蛋性能的分子標(biāo)記分析。
1.利用cDNA-AFLP方法,檢測(cè)番鴨在就巢期和非就巢期的基因差異表達(dá),共出現(xiàn)條帶1100條,其中約有82條的差異表達(dá)片段,從中成功克隆15條;經(jīng)數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)分析,其中有8條與已知或假定的基因存在明顯
2、同源性,2個(gè)未知功能的基因有同源性,5個(gè)與數(shù)據(jù)庫(kù)中現(xiàn)有的基因沒(méi)有明顯的相似性。隨機(jī)從中抽取3條進(jìn)行RT-PCR驗(yàn)證,結(jié)果均與cDNA-AFLP完全相同。
2.在8條與已知或假定的基因存在明顯同源性的片段中,確定與禽類產(chǎn)蛋性能相關(guān)的基因包括GnRH、GH和FSH三條。其余還有某些基因,如超氧化物歧化酶、角蛋白關(guān)聯(lián)蛋白、硫氰酸酶釋放硫基轉(zhuǎn)移酶等。
3.番鴨候選基因兩對(duì)引物檢測(cè)到的多態(tài)位點(diǎn)均處Hardy-Weinb
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