大豆GmcpSecA基因克隆及表達(dá)特異性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、Sec途徑是將核編碼的葉綠體蛋白輸入到類(lèi)囊體腔的蛋白分選途徑之一，對(duì)葉綠體正確行使其功能有重要作用。前期研究獲得了擬南芥AtcpSecA基因功能缺失的突變體agy1，其葉片呈黃白色，葉綠體發(fā)育缺陷，內(nèi)部缺少類(lèi)囊體片層結(jié)構(gòu)。我們從大豆中克隆了擬南芥AtcpSecA的同源基因GmcpSecA基因的全長(zhǎng)cDNA序列和5’端ATG上游1.5kb的啟動(dòng)子；同時(shí)構(gòu)建了GmcpSecA::GUS和CaMV35S::GmcpSecA融合基因的雙元表達(dá)載

2、體，以農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法獲得轉(zhuǎn)基因擬南芥。GUS組織化學(xué)染色結(jié)果表明：在GmcpSecA::GUS轉(zhuǎn)基因擬南芥的子葉、葉片、萼片等綠色組織中都可以檢測(cè)到較強(qiáng)的GUS活性，而在非綠色組織中沒(méi)有檢測(cè)到GUS表達(dá)。
　　 以雙元表達(dá)載體CaMV35S::GmcpSecA轉(zhuǎn)化擬南芥葉綠體結(jié)構(gòu)與功能缺失突變體agy1，發(fā)現(xiàn)GmcpSecA基因能部分回補(bǔ)agy1突變體的表型。推測(cè)GmcpSecA基因與AtcpSecA基因功能相似，在葉綠體

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