自身免疫性肝病Kupffer細(xì)胞抗原呈遞分子的表達(dá)變化.pdf

1、目的：肝臟kupffer細(xì)胞抗原呈遞功能的變化在自身免疫性肝病（ALD）的發(fā)病機(jī)制中占有重要位置，本文擬探討肝臟kupffer細(xì)胞抗原呈遞分子的表達(dá)在自身免疫性肝病中的變化情況。首先觀察肝穿組織CD40/CD68、CD80/CD68、HLA-DR/CD68免疫熒光共定位染色的情況，明確抗原呈遞分子CD40、CD80、HLA-DR均在肝臟kupffer細(xì)胞上表達(dá)，進(jìn)而比較肝穿組織中CD40、HLA-DR免疫組化染色結(jié)果，探索其在自身免疫性

2、肝病中的表達(dá)情況，并探討 CD40、HLA-DR是否具有相關(guān)性。最后分析 CD40、HLA-DR與肝功能、凝血功能等化驗(yàn)結(jié)果的關(guān)系，揭示肝臟kupffer細(xì)胞抗原呈遞分子的表達(dá)在自身免疫性肝病發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　方法：
　?。?）選擇2010年1月至2015年6月在天津市總醫(yī)院消化內(nèi)科就診并行肝穿檢查的患者，按照自身免疫性肝炎（AIH）、原發(fā)性膽汁性膽管炎（PBC）、PBC-AIH重疊綜合征（PBC-AIH OS）的診斷

3、標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分組，并將酒精性肝病、脂肪肝、慢性病毒性肝炎作為非自身免疫性肝病患者組用于對(duì)照（以下簡(jiǎn)稱為非自免肝組），并記錄入選患者的血生化、凝血功能等檢查結(jié)果。
　　（2）對(duì)入選患者肝穿的冰凍切片分別進(jìn)行CD40/CD68、CD80/CD68、HLA-DR/CD68免疫熒光共定位染色，觀察CD40、CD80、HLA-DR在肝臟組織中的表達(dá)情況。
　?。?）對(duì)入選患者肝穿的石蠟切片分別進(jìn)行CD40、HLA-DR免疫組化染色，隨機(jī)選

4、取10個(gè)高倍鏡視野（400倍），統(tǒng)計(jì)CD40+kupffer細(xì)胞及HLA-DR+kupffer細(xì)胞的數(shù)量，取均值，利用方差分析進(jìn)行組間比較。
　　（4）將CD40、HLA-DR的免疫組化結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性比較。（5）將CD40、HLA-DR的免疫組化結(jié)果與肝功能、凝血功能等生化指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：
　?。?）免疫熒光雙染結(jié)果顯示CD40、CD80、HLA-DR均在肝臟CD68+kup ffer細(xì)胞上表達(dá)。

5、>　　（2）免疫組化試驗(yàn)中，CD40在自身免疫性肝病組的陽性細(xì)胞數(shù)低于對(duì)照組。CD40免疫組化陽性產(chǎn)物呈棕褐色或棕黃色顆粒狀著色，主要位于細(xì)胞膜，少部分位于細(xì)胞質(zhì)。分別計(jì)算自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性膽管炎和非自身免疫性肝病3組肝穿標(biāo)本中的CD40陽性的kupffer細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值，結(jié)果顯示：3組間CD40陽性的kupffer細(xì)胞的計(jì)數(shù)絕對(duì)值比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AIH與PBC組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；AIH與非自免肝組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

6、>　　（3）免疫組化中，HLA-DR在自身免疫性肝病組的陽性細(xì)胞數(shù)低于對(duì)照組，HLA-DR免疫組化染色陽性產(chǎn)物呈棕褐色顆粒，主要位于細(xì)胞膜。分別統(tǒng)計(jì)AIH、PBC和非自身免疫性肝病3組的HLA-DR陽性的kupffer細(xì)胞計(jì)數(shù)的絕對(duì)值，結(jié)果顯示3組比較其結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，AIH與非自身免疫性肝病組比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　?。?）CD40與HLA-DR進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示呈正相關(guān)。
　　（5）CD40、HLA-DR結(jié)果與

7、肝功能、凝血功能化驗(yàn)檢查結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示CD40、HLA-DR與AIH患者的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）具有相關(guān)性。
　　結(jié)論：
　?。?）CD40、HLA-DR、CD80主要在肝臟kupffer細(xì)胞上表達(dá)，抗原呈遞分子的變化可能引起抗原呈遞功能的改變。
　　（2）自身免疫性肝病患者組的肝穿石蠟切片免疫組化染色顯示CD40及HLA-DR表達(dá)較非自身免疫性肝病組數(shù)量減少，且 CD40、HLA-D