急性肺損傷早期VEGF和CEC水平的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　 探討內(nèi)毒素（lipopolysaccharide, LPS）致大鼠急性肺損傷（acutelung injury，ALI）早期血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（vascular endotheliAlgrowth factor，VEGF）和循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞（circulating endotheliAlcells，CECs）的變化，并且觀察肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的病理改變 ，為ALI的發(fā)病機(jī)制提供進(jìn)一步的理論依據(jù)，為ALI的早期診斷和病情監(jiān)

2、測(cè)提供新的思路。
　　 方法：
　　 健康雄性Wistar大鼠32只隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組：大鼠尾靜脈注射1ml 生理鹽水；LPS2h，4h，6h組：LPS 劑量為5mg/kg 體重量，生理鹽水稀釋至1ml 尾靜脈注射，復(fù)制ALI 模型；觀察各組大鼠一般狀況并分別在造模后2h，4h，6h 留取標(biāo)本，測(cè)定血?dú)夥治觯幻嘎?lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）法檢測(cè)血

3、清及肺組織中VEGF的含量；密度梯度離心法分離并計(jì)數(shù)CEC；并觀察各組大鼠光鏡及電鏡下肺臟組織及肺血管內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。
　　 結(jié)果：
　　 1.一般狀態(tài)觀察：正常對(duì)照組大鼠呼吸均勻，精神狀態(tài)良好；LPS2h組大鼠呼吸增快，精神萎靡；LPS4h組大鼠呼吸急促，少動(dòng)；LPS6h組大鼠呼吸窘迫，口唇紫紺，個(gè)別大鼠有粉紅色泡沫樣液體自口鼻流出。2. PaO2和PaO2/FiO2的比較：LPS2h組PaO2和PaO2/FiO

4、2與正常對(duì)照組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，LPS4,6h組較正常對(duì)照組顯著降低(P＜0.01)。3. 各組血清及肺組織中VEGF 含量的比較：LPS 各組血清VEGF水平與正常對(duì)照組相比顯著升高(P＜0.01)，LPS 各組肺組織VEGF水平與正常對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）, 血清及肺組織VEGF水平在LPS 各組之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。4. 各組CEC 計(jì)數(shù)的比較：LPS 各組CEC水平與

5、正常對(duì)照組相比顯著升高(P＜0.01)，LPS4h，6h組CEC水平與LPS2h組比較，差異顯著(P＜0.01)， LPS6h組與LPS4h組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。5. PaO2與血清VEGF水平、CEC細(xì)胞數(shù)的相關(guān)分析：PaO2與血清VEGF水平及CEC細(xì)胞數(shù)呈負(fù)相關(guān)（r=-0.780，P<0.01；r=-0.764，P<0.01），血清VEGF水平與CEC細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān)（r=0.770，P<0.01）。6. 病理

6、片對(duì)照：正常對(duì)照組：肺組織結(jié)構(gòu)清晰、肺泡壁薄、光滑，肺泡間隔均勻一致；LPS2h組：肺泡腔輕度變窄，部分肺泡壁增厚，肺充血，肺間質(zhì)輕度水腫，小灶狀炎細(xì)胞浸潤(rùn)；LPS4h組：肺泡腔變窄，腔內(nèi)可見炎細(xì)胞浸潤(rùn),肺泡壁增厚，肺充血，肺間質(zhì)水腫，灶狀炎細(xì)胞浸潤(rùn)，并見局部肺氣腫；LPS6h組：肺泡腔變窄或消失，腔內(nèi)可見炎細(xì)胞明顯增多，肺泡壁明顯增厚，肺充血,肺間質(zhì)水腫,炎細(xì)胞彌漫性浸潤(rùn)，并見局部肺氣腫。7. 電鏡片對(duì)照：電鏡下觀察正常組大鼠肺血管內(nèi)

7、皮細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)規(guī)則，細(xì)胞間連接緊密，血管內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)可見較多線粒體，形態(tài)清晰并且嵴膜系統(tǒng)完整；LPS2h組肺血管內(nèi)皮細(xì)胞輕度腫脹，部分細(xì)胞間連接欠緊密，肺血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)線粒體基質(zhì)密度下降，腫脹，部分線粒體嵴溶解；LPS4h組肺血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，部分細(xì)胞胞漿空泡化，細(xì)胞連接松解，肺血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)線粒體腫脹更加嚴(yán)重，大部分線粒體線嵴溶解；LPS6h組肺血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹更加明顯，細(xì)胞胞漿空泡化，細(xì)胞分離，并且出現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞與肺泡上皮細(xì)胞分離，