壯藥鐵包金的資源與品質(zhì)研究.pdf

1、鐵包金為廣西壯族地區(qū)常用的一味重要的民族藥(壯藥名：Gaeunourwz勾耨叻)，始載于《嶺南采藥錄》，并為《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)(1990)》所收載。該標(biāo)準(zhǔn)收載的鐵包金為鼠李科勾兒茶屬植物老鼠耳(細(xì)葉勾兒茶)Berchemia lineata(L.)DC.的干燥根。老鼠耳(細(xì)葉勾兒茶)主要分布于廣西、廣東、福建、海南、臺(tái)灣等省區(qū)，在越南、印度、錫金、日本等國家也有分布；生長于低海拔的山野、路旁、坡地或開曠地上。其性味淡、澀，平，具有散瘀，止

2、血，止痛，鎮(zhèn)咳，消滯(壯醫(yī)：除濕毒，祛風(fēng)毒，清熱毒，調(diào)氣道谷道，通龍路火路)等多種功效，用于多種腫瘤、炎癥、黃疸型肝炎、肺結(jié)核咯血、頸淋巴結(jié)腫大、咳嗽、消化道出血、風(fēng)濕痹痛、痛風(fēng)、頭痛、腹痛、糖尿病、心臟病、精神分裂、婦女經(jīng)痛、風(fēng)火牙痛、睪丸腫痛、蕁麻疹、痔瘡、癰瘡、疔瘡、跌打損傷等病癥；外用治外傷出血、燙火傷、毒蛇咬傷等。
　　 文獻(xiàn)報(bào)道及我們的前期研究工作表明，鐵包金用于復(fù)方中治療腫瘤和多種炎癥性疾病有較好的療效，是廣西正在

3、研制的抗腫瘤新藥“壯藥復(fù)方鐵草膠囊[2006年國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2006BAI06A17)]”、“壯藥排毒膠囊”[2009年廣西壯族自治區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑項(xiàng)目(桂L100001)]及“復(fù)方紅豆杉膠囊”[2000年廣西民族藥制劑(2000ML-3號)]的主要藥物組分之一。隨著對鐵包金的研究開發(fā)和臨床應(yīng)用的深入，鐵包金的藥用價(jià)值越來越受到重視。
　　 在系統(tǒng)查閱了國內(nèi)外鐵包金的植物資源、化學(xué)成分、藥理作用、臨床應(yīng)用

4、及產(chǎn)業(yè)開發(fā)等研究文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，我們發(fā)現(xiàn)涉及到鐵包金資源與質(zhì)量的基礎(chǔ)研究很少，對其資源和商品品種以及主要活性成分尚不了解，其市售商品混亂，目前尚無對鐵包金藥材進(jìn)行有效的質(zhì)量控制以及根據(jù)質(zhì)量對鐵包金商品品種進(jìn)行有效選擇的方法以保證療效。因此，本論文對鐵包金的資源、品種、生藥性狀和顯微鑒別、薄層鑒別、含量測定、指紋圖譜、抗腫瘤作用及其活性部位的成分、鐵包金在相關(guān)制劑中的提取工藝和質(zhì)量控制方法等進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，以期為該民族藥物的現(xiàn)代研究和臨床

5、應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 通過對廣西壯族地區(qū)、西南地區(qū)藥材市場的鐵包金藥材和產(chǎn)地原植物的系統(tǒng)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)廣西壯族地區(qū)臨床常用的鐵包金藥材并非只是細(xì)葉勾兒茶的根，實(shí)際包括細(xì)葉勾兒茶(老鼠耳)Berchemia lineata(L.)DC.、多葉勾兒茶Berchemia polyphylla Wall.ex Laws.var.polyphylla、光枝勾兒茶Berchemia polyphylla var.leioclada(Hand

6、.-Mazz.)Hand.-Mazz.以及多花勾兒茶Berchemia floribunda(Wall.)Brongn.等多種植物的莖藤或根。這些植物的莖藤或根實(shí)際上在西南各地區(qū)同等作為鐵包金藥材入藥。其中，細(xì)葉勾兒茶資源較少，而光枝勾兒茶、多葉勾兒茶以及多花勾兒茶是市場上鐵包金的主流品種。這為鐵包金藥材的深入研究奠定了基礎(chǔ)。
　　 通過采集原植物標(biāo)本，觀察和描述了鐵包金的根、莖、葉的性狀和組織結(jié)構(gòu)特征，攝制了各種顯微鑒別特征圖

7、。研究發(fā)現(xiàn)，鐵包金根、莖、葉的性狀，根、莖橫切面結(jié)構(gòu)，葉的粉末和葉緣的顯微特征明顯，可作為該類藥材鑒別的依據(jù)，并能把不同來源的鐵包金藥材品種區(qū)別開，從而建立了鐵包金的生藥鑒別方法。
　　 根據(jù)本屬植物普遍含有有效成分黃酮類成分尤其是槲皮素的特點(diǎn)，對廣西產(chǎn)鐵包金藥材進(jìn)行了薄層色譜法定性鑒別與分析，并對主要采自廣西武鳴縣甘圩鎮(zhèn)的10批鐵包金藥材樣品用高效液相色譜法測定了其槲皮素成分的含量。色譜柱為迪馬ODS C18(4.6 mm×2

8、50 mm，5μm)；流動(dòng)相為乙腈-甲醇(5:1)A：0.1％磷酸溶液B(梯度：0-30min，20-60％A)；流速0.85mL/min；檢測波長360nm，柱溫30℃。槲皮素在0.69μg～4.83μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.9998(n=7)，平均回收率為99.8％(RSD：1.27％，n=6)。建立了鐵包金藥材中槲皮素的含量測定方法，從而為更好地控制鐵包金藥材質(zhì)量提供了一定的科學(xué)依據(jù)。
　　 參照相關(guān)文獻(xiàn)，采用高效液

9、相色譜法，首次對鐵包金藥材進(jìn)行了指紋圖譜研究，初步建立了鐵包金2個(gè)種[細(xì)葉勾兒茶Berchemia lineata(L.)DC.，光枝勾兒茶Berchemia polyphylla var.leioclada(Hand.-Mazz.)Hand.-Mazz.]多個(gè)樣品藥材的HPLC指紋圖譜。其中細(xì)葉勾兒茶以蘆丁為參照峰，建立了乙酸乙酯提取部分15個(gè)特征峰的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜(確定了各個(gè)峰的相應(yīng)豐度)；光枝勾兒茶以槲皮素為參照峰，建立了乙酸乙酯提

10、取部分18個(gè)特征峰的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜(確定了各個(gè)峰的相應(yīng)豐度)。為鐵包金藥用植物的深入研究及其應(yīng)用提供指紋信息，并為鐵包金藥材的質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。
　　 對鐵包金(細(xì)葉勾兒茶)提取物的體內(nèi)抗腫瘤作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。以S180肉瘤、小鼠肝癌H22腹水瘤作為實(shí)驗(yàn)瘤株，觀察鐵包金提取物對S180肉瘤、H22腹水瘤抑瘤率；對S180肉瘤、H22腹水瘤進(jìn)行腫瘤生存期試驗(yàn)。結(jié)果，鐵包金提取物明顯抑制S180肉瘤和H22腹水瘤小鼠體內(nèi)腫瘤的發(fā)

11、生和發(fā)展，其不同劑量對S180肉瘤抑瘤率分別為62.8％、55.8％和53.5％；對H22腹水瘤抑瘤率分別為70.4％、64.2％和38.3％；鐵包金提取物能顯著提高S180肉瘤和H22腹水瘤小鼠的生命延長率，其不同劑量生命延長率分別達(dá)到46.0％、35.5％、42.3％和33.7％、40.7％、38.7％。鐵包金提取物抑瘤作用與劑量呈正相關(guān)關(guān)系，而腫瘤生存期試驗(yàn)結(jié)果與劑量關(guān)系不明顯。鐵包金提取物體內(nèi)試驗(yàn)表明能延緩荷瘤小鼠的瘤體生長，明

12、顯延長荷瘤小鼠的生存期，還能改善荷瘤小鼠免疫機(jī)能作用。
　　 本文還在上述研究的基礎(chǔ)上考察了制劑中鐵包金的質(zhì)量。以干膏收率及鐵包金中的主要成分槲皮素的含量為考察指標(biāo)，對以鐵包金(細(xì)葉勾兒茶)為主藥的壯藥排毒膠囊劑的乙醇提取工藝進(jìn)行正交試驗(yàn)研究，考察乙醇的濃度、乙醇的用量、乙醇回流時(shí)間、回流次數(shù)等對提取效果的影響，確定了該制劑中鐵包金的最佳工藝。同時(shí)，為了有效地控制該制劑的質(zhì)量，采用薄層色譜法對制劑中鐵包金進(jìn)行了定性鑒別，采用高效