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文檔簡介
1、本論文共分4個試驗研究了維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積及堿性磷酸和骨鈣素基因表達(dá)的影響。試驗1~試驗3利用體內(nèi)法,采用單因子完全隨機(jī)試驗設(shè)計,將1日齡健康愛拔益加(AA)肉雞(公母各半H50只,隨機(jī)分為5個日糧處理組,每個處理組6個重復(fù),每個重復(fù)組15只雞,試驗期42天。以玉米和豆粕為主要原料配制基礎(chǔ)日糧(基礎(chǔ)日糧中不添加維生素A),5種試驗日糧分別是在基礎(chǔ)日糧中添加:3000、6000、15000、30000和60000 IU/kg的維
2、生索A配制而成。試驗1通過研究過量維生素A對肉雞血清鈣、磷及脛骨鈣、磷含量、脛骨BMD及脛骨灰分的影響,進(jìn)一步驗證過量維生素A對肉雞鈣、磷沉積的影響。試驗2主要通過研究維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積相關(guān)激素及骨形成標(biāo)志物的影響,探討了維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積的影響機(jī)制。試驗3主要通過研究維生素A過量對肉雞脛骨、肝臟及小腸組織中ALP mRNA和BGP mRNA相對表達(dá)量的影響,探討了過量維生索A對肉雞鈣、磷沉積影響的分子機(jī)理,試驗4利
3、用體外細(xì)胞培養(yǎng)法,研究了不同濃度維生素A(0,0.03,0.10,0.30,1.00,2.00,6.00,12.00,24.00μg/ml對肉雞顱骨成骨細(xì)胞分泌功能及ALP,RNA和BGPmRNA相對表達(dá)量的影響,從成骨細(xì)胞活性的角度在細(xì)胞水平和分子水平上進(jìn)一步探討了維生素A過量對肉雞鈣、磷沉積的影響機(jī)制。
在本研究的試驗條件下初步得出以下結(jié)果:
①肉雞脛骨鈣、磷沉積和脛骨強(qiáng)度與日糧維生素A水平呈顯著或趨于顯
4、著的劑量依賴關(guān)系(P<0.05;P<0.10]。其中,脛骨鈣磷沉積與脛骨強(qiáng)度以3000- 6000 IU/kg維生素A組較高:30000~60000IU/kg維生素A組較低;日糧維生素A水平為15000IU/kg時,脛骨鈣、磷沉積與脛骨強(qiáng)度也呈一定降低趨勢。
②日糧維生素A水平在3000-60000IU/kg范圍內(nèi),日糧維生素A水平以劑量依賴模式影響肉雞的血清PTH、CT、1,25(OH)2D3、BOP與PINP濃度及血清
5、ALP和BAP活性(P<0.05;P<0.10]。其中,30000-6000 IU/kg的高劑量維生素A引起肉雞血清中PTH濃度升高,CT與1,25(OH)2D3濃度及BGP與PINP濃度降低,ALP與BAP活性降低。
③隨日糧維生素A添加劑量的升高,肉雞脛骨、肝臟及小腸組織中ALPmRNA和BGP mRNA相對表達(dá)量均呈不同程度降低,二者呈顯著(P<0.05)或趨于顯著(P>0.10)的一次線性或二次曲線劑量依賴關(guān)系:其
6、表達(dá)量均以3000-6000 IU/kg維生素A日糧組較高,30000-60000 IU/kg維生索A日糧組較低,15000IU/kg維生素A日糧組居中。提示日糧維生素A過量可下調(diào)肉雞脛骨和肝臟及小腸組織中ALPmRNA和。BGP mRNA的相對表達(dá)量。
④隨培養(yǎng)液中維生素A水平的增加,肉雞成骨細(xì)胞培養(yǎng)液中ALP活性、BGP、PINP、OPN和OPG濃度呈顯著的一次線性降低(P<0.05)或二次曲線降低趨勢(P<0.10)
7、。提示維生素A水平以劑量依賴模式影響肉雞成骨細(xì)胞的功能和活性,適宜的維生素A水平可促進(jìn)成骨細(xì)胞的活性,誘導(dǎo)其分化成熟,但高劑量的維生素A抑制成骨細(xì)胞的活性和分化成熟。
⑤隨培養(yǎng)液中維生素A水平的增加,成骨細(xì)胞ALPmRNA相對表達(dá)量呈顯著的一次線性或一元二次降低(P<0.05),BGP mRNA相對表達(dá)量呈一元二次降低趨勢(P<0.10)。提示維生素A以劑量依賴模式影響成骨細(xì)胞ALP mRNA與BOP mRNA相對表達(dá)量,
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