全氟化合物PFOA對雄性黑斑蛙的生殖毒效應(yīng)及機理研究.pdf

1、全氟辛酸（PFOA）是一種人工合成的全氟化合物（PFCs），分布廣泛，具有環(huán)境持久性和難降解性，并能引起生物毒性效應(yīng)。從物種保護的角度探究PFOA對兩棲類黑斑蛙生殖毒性影響有非常重要的意義。本項研究選取全氟化合物PFOA為目標(biāo)污染物，選取兩棲動物雄性黑斑蛙為研究對象，采用靜態(tài)置換法和體內(nèi)暴露實驗方法，研究PFOA對雄性黑斑蛙生殖毒效應(yīng)及致毒機理。
　　體內(nèi)暴露實驗結(jié)果表明暴露于0.01-1mg/L PFOA溶液的黑斑蛙精子數(shù)量和活

2、性顯著下降，精子畸形率顯著升高，其中1mg/LPFOA溶液暴露后，精子的數(shù)量下降了43.7%，精子的活性降低55.1%，而精子的畸形率升高了1.84倍；對黑斑蛙與精子發(fā)生密切相關(guān)的ATP酶活性進行了檢測，結(jié)果表明Na+K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和Ca2+Mg2+-ATP酶的活性也隨著PFOA暴露濃度的升高而顯著上升，其中1mg/L PFOA溶液暴露后，Na+K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶和Ca2+Mg2+-ATP酶的活性分別

3、上升了2.05、1.97和1.97倍，結(jié)果表明精巢中離子穩(wěn)態(tài)失衡，干擾精子發(fā)生及成熟；隨著低劑量PFOA暴露濃度的升高，睪酮含量顯著降低，而雌二醇含量則顯著升高，性激素分泌嚴(yán)重失調(diào)；qRT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，芳香化酶P450基因和類固醇因子SF-1基因相對表達量水平都顯著上升，表明了PFOA通過調(diào)節(jié)芳香化酶P450和類固醇因子SF-1基因表達量，干擾性激素合成。
　　通過電鏡實驗觀察分析PFOA暴露后黑斑蛙精巢中的超微結(jié)構(gòu)變化。PF

4、OA溶液暴露后，生精支持細(xì)胞出現(xiàn)空泡、細(xì)胞分散和細(xì)胞結(jié)構(gòu)不完整等現(xiàn)象；生精支持細(xì)胞微出現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴大、線粒體浮腫、細(xì)胞核畸形等結(jié)構(gòu)變化；精子微結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)了空泡、尾部畸形等現(xiàn)象。對雄性黑斑蛙精巢抗氧化系統(tǒng)檢測，結(jié)果表明活性氧ROS和丙二醛MDA的含量顯著升高，同時超氧化物歧化酶SOD和過氧化氫酶CAT活性升高，還原型谷胱甘肽GSH含量明顯上升，谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶GST活性下降，琥珀酸脫氫酶 SDH和乳酸脫氫酶 LDH活性明顯上升，其中1mg/

5、LPFOA溶液暴露后，ROS水平和MDA含量分別上升了2.91倍和3.51倍，結(jié)果表明 PFOA引起了脂質(zhì)過氧化損傷，破壞了黑斑蛙精巢的抗氧化系統(tǒng)的穩(wěn)態(tài)，引起黑斑蛙的氧化應(yīng)激反應(yīng)；Western Blotting蛋白檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著PFOA暴露濃度的升高，Bax蛋白和Caspase3、8、9蛋白表達水平顯著增加，而Bcl-2蛋白的表達水平則降低，表明了PFOA通過線粒體通路誘導(dǎo)了黑斑蛙精巢細(xì)胞發(fā)生凋亡。此外，PFOA溶液暴露后，Cho