飲水型鉛中毒對(duì)兔膝關(guān)節(jié)軟骨影響的研究.pdf

1、目的：
　　 1.觀察慢性飲水型鉛中毒時(shí)，新西蘭兔血液、骨、滑膜及關(guān)節(jié)軟骨中的鉛含量及分布特點(diǎn)；
　　 2.觀察慢性飲水型鉛中毒對(duì)新西蘭兔膝關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)學(xué)及關(guān)節(jié)軟骨組成成分基因表達(dá)的影響。
　　 方法：取新西蘭兔40只，雌雄不限，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組20只。對(duì)照組給予正常飲用水飼養(yǎng)；實(shí)驗(yàn)組給予含醋酸鉛（1g/L）飲用水飼養(yǎng)，共飼養(yǎng)3個(gè)月，飼養(yǎng)期內(nèi)觀察各組動(dòng)物精神狀態(tài)及體重的變化情況。隨機(jī)抽取每組14只動(dòng)物

2、，心臟采血，測(cè)定血鉛含量；取右膝上1cm 處的股骨，測(cè)定骨中的鉛含量；取雙膝滑膜，測(cè)定滑膜中的鉛含量；取雙膝關(guān)節(jié)軟骨，測(cè)定關(guān)節(jié)軟骨中的鉛含量。隨機(jī)抽取每組3只動(dòng)物，切取雙側(cè)完整膝關(guān)節(jié)，大體觀察軟骨及滑膜的形態(tài)，并行組織脫鈣包埋切片，行軟骨HE、番紅O及甲苯胺蘭染色，光鏡觀察，行軟骨Mankin組織學(xué)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分，行滑膜HE 染色并行病理學(xué)炎癥分級(jí)。隨機(jī)抽取每組3只動(dòng)物，取股骨髁負(fù)重區(qū)關(guān)節(jié)軟骨，透射電鏡觀察軟骨細(xì)胞及其線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞

3、器的形態(tài)和細(xì)胞外基質(zhì)中膠原纖維的走行及分布，取余關(guān)節(jié)軟骨應(yīng)用實(shí)時(shí)定量RT-PCR 法定量檢測(cè)軟骨中II 型膠原和糖胺多糖的mRNA表達(dá)量。
　　 結(jié)果：
　　 1.對(duì)照組體重增加呈上升趨勢(shì)；實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物較對(duì)照組體重增長(zhǎng)緩慢，增長(zhǎng)曲線較平直，從染鉛第4周開(kāi)始體重增加落后于對(duì)照組(P<0.05)，并始終維持在較低水平(P<0.05)。
　　 2.與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組血液、骨、滑膜及關(guān)節(jié)軟骨中的鉛含量均明顯增加（P<0.

4、01）。實(shí)驗(yàn)組鉛含量以骨內(nèi)最高，其次為滑膜、關(guān)節(jié)軟骨和血液。關(guān)節(jié)軟骨中的鉛含量與血液、骨及滑膜中的鉛含量均呈線性正相關(guān)（P<0.01）。
　　 3.實(shí)驗(yàn)組關(guān)節(jié)軟骨、滑膜等大體觀察與對(duì)照組相比未見(jiàn)明顯差別，關(guān)節(jié)軟骨表面光滑，有光澤；滑膜未見(jiàn)充血和腫脹；HE染色光鏡觀察發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞減少；番紅O及甲苯胺藍(lán)染色，均證實(shí)深層基質(zhì)染色較正常軟骨變淺。軟骨的Mankin評(píng)分及滑膜炎癥分級(jí)實(shí)驗(yàn)組均較對(duì)照組高（P<0.05）。透射電鏡

5、進(jìn)一步證實(shí)，實(shí)驗(yàn)組軟骨細(xì)胞形狀不規(guī)則，胞膜邊界尚清且出現(xiàn)不連續(xù)現(xiàn)象，胞漿線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器腫脹和崩解，可見(jiàn)大的空泡，胞核變形；實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組細(xì)胞周圍膠原纖維稀疏，未見(jiàn)明顯的網(wǎng)格狀排列。
　　 4.實(shí)驗(yàn)組兔膝關(guān)節(jié)軟骨中Ⅱ型膠原的mRNA表達(dá)量較對(duì)照組顯著減少（P<0.05）；關(guān)節(jié)軟骨中糖胺多糖的mRNA表達(dá)量較對(duì)照組顯著減少（P<0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1．慢性飲水型鉛中毒時(shí)鉛在血液、骨、滑膜及關(guān)節(jié)軟