慢性HBV感染者肝臟組織中FoxP3+Tregs和IL-17+T細(xì)胞的表達(dá)水平及意義.pdf

1、背景：已知CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞在HBV病毒感染過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用。輔助性T細(xì)胞17(T helper cell17, Th17)和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells, Tregs)屬于CD4+T淋巴細(xì)胞亞群。Th17細(xì)胞和Tregs細(xì)胞在自身免疫性疾病和機(jī)體防御過(guò)程中均發(fā)揮著舉足輕重的作用，二者無(wú)論是數(shù)量上或者是功能上的改變都有導(dǎo)致自身免疫性疾病發(fā)生的可能性，總之Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞在很大程度上

2、參與了免疫調(diào)節(jié)，與自身免疫性疾病如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、潰瘍性結(jié)腸炎等的發(fā)病及進(jìn)展有一定的關(guān)系。近年研究報(bào)道 Th17細(xì)胞和 Tregs細(xì)胞與急性乙型病毒性肝炎(Acute Hepatitis B, AHB)、慢性乙型病毒性肝炎(Chronic Hepatitis B, CHB)、乙肝肝硬化(HBV-associated Liver cirrhosis, HBV-LC)、HBV相關(guān)的肝功能衰竭(HBV-associated Li

3、ver Failure, HBV-LF)，甚至具有HBV背景的肝細(xì)胞肝癌(Hepatocellular carcinnoma, HCC)等急性、慢性HBV感染相關(guān)的肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，它們?cè)诒磉_(dá)水平和功能上的改變有可能影響患者相關(guān)肝臟疾病的發(fā)展方向及預(yù)后。慢性HBV感染史一般被劃分為免疫耐受期、免疫清除期、低復(fù)制期以及再活動(dòng)期4個(gè)階段，每個(gè)時(shí)期都具有不同的病毒學(xué)、生物化學(xué)指標(biāo)以及相應(yīng)的組織病理學(xué)改變，臨床上也常以此對(duì)患者進(jìn)行分期

4、，從而指導(dǎo)治療、判斷預(yù)后。目前已經(jīng)有關(guān)于HBV感染者在處于不同免疫狀態(tài)時(shí)其體內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞的表達(dá)水平的研究，且這些實(shí)驗(yàn)一般都基于患者的外周血，然而HBV感染者外周血的情況并不能完全反應(yīng)出肝臟組織學(xué)情況和病理學(xué)進(jìn)展情況。部分基于肝臟組織學(xué)的研究又大都限于免疫耐受期和免疫清除期的患者，對(duì)于免疫耐受期、免疫清除期、低復(fù)制期和再活動(dòng)期這4個(gè)階段的整體研究尤其是基于肝臟組織學(xué)基礎(chǔ)上的相關(guān)研究尚缺乏，因此我們的實(shí)驗(yàn)不僅對(duì)慢

5、性HBV感染者肝臟組織中CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞、FoxP3+Tregs細(xì)胞以及IL-17+T細(xì)胞的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，還分別對(duì)CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞、FoxP3+Tregs細(xì)胞以及IL-17+T細(xì)胞在免疫耐受期、免疫清除期、低復(fù)制期和再活動(dòng)期中的表達(dá)水平進(jìn)行了比較。
　　目的：⑴旨在檢測(cè)慢性HBV感染者肝臟組織中的FoxP3+Tregs細(xì)胞、IL-17+T細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞的

6、表達(dá)情況并與健康對(duì)照組相比較。⑵分析FoxP3+Tregs細(xì)胞和IL-17+T細(xì)胞跟相關(guān)的臨床指標(biāo)以及IL-17+T細(xì)胞與肝臟的組織學(xué)炎癥纖維化指數(shù)之間的關(guān)系。⑶對(duì)符合條件的慢性HBV感染者進(jìn)行免疫學(xué)分期，并比較免疫耐受期、免疫清除期、低復(fù)制期、再活動(dòng)期患者肝臟組織中FoxP3+Tregs細(xì)胞、IL-17+T細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞的表達(dá)水平之間的差異并探討其臨床意義。
　　方法：選取71例慢性HBV感染者的肝

7、臟組織進(jìn)行連續(xù)切片，其中29例來(lái)自慢性乙型肝炎(chronichepatitis B,CHB)患者，42例取自乙肝肝硬化(HBV-relatedliver cirrhosis,HBV-LC)患者，運(yùn)用免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry, IHC)染色的方法分別檢測(cè)FoxP3+Tregs細(xì)胞、IL-17+T細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞在肝臟組織中的表達(dá)情況，并與作為健康對(duì)照組(healthy contr

8、ol, HC)的34例正常肝臟組織進(jìn)行比較，健康對(duì)照組的肝臟組織取自肝臟血管瘤周圍的正常肝臟組織，或是肝臟囊腫周圍的正常肝臟組織。
　　結(jié)果：①CHB及HBV-LC患者肝臟組織中FoxP3+ Tregs細(xì)胞，IL-17+T細(xì)胞，CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞的表達(dá)水平均明顯高于HC組，P<0.01；CHB患者肝臟組織中的FoxP3+Tregs細(xì)胞，IL-17+T細(xì)胞，CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞與LC患者比較，表

9、達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P>0.05。②IL-17+T細(xì)胞隨肝臟組織學(xué)炎癥分級(jí)的上升有一定程度的升高(G3-G4 vs G1-G2, P=0.053)。③慢性HBV感染者肝臟組織中的 FoxP3+Tregs細(xì)胞與其外周血 AST正相關(guān)(r=0.382, P=0.028)，并隨肝臟組織中CD8+T淋巴細(xì)胞的增加而增加(P<0.001)。④FoxP3+Tregs細(xì)胞、IL-17+T細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞中的任一細(xì)胞在免疫耐

10、受期、免疫清除期、低復(fù)制期和再活動(dòng)期患者肝臟組織中的表達(dá)水平兩兩相比，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P>0.05。
　　結(jié)論：⑴肝臟組織學(xué)角度進(jìn)一步證實(shí)IL-17+T細(xì)胞與慢性HBV感染相關(guān)；⑵肝臟組織中FoxP3+Tregs細(xì)胞的增加對(duì)慢性HBV感染者肝臟組織損傷程度的加重也許能夠起到預(yù)警作用；⑶IL-17+T細(xì)胞、FoxP3+Tregs細(xì)胞與慢性HBV感染者的免疫學(xué)分期尚無(wú)明確關(guān)系；⑷CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞在免疫耐受期、免疫