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文檔簡介
1、目的: 泛素蛋白酶體通路(Ubiquitin Proteasome Pathway,UPP)主要是對細胞內(nèi)的異常蛋白質(zhì)進行降解,在維持細胞的生理功能方面發(fā)揮著極其重要的作用。目前發(fā)現(xiàn)的許多遺傳性和獲得性疾病的發(fā)生都與此系統(tǒng)功能失調(diào)有關(guān)。本實驗通過檢測慢性乙型肝炎(簡稱慢乙肝)、活動性肝炎肝硬化、慢性重型肝炎患者外周血淋巴細胞(Peripheral Blood Lymphocyte,PBL)中泛素mRNA的表達,探討其與慢性HBV
2、活動性感染的關(guān)系及臨床意義。 方法: 研究對象為96例慢性HBV感染并有炎癥活動者,其中慢乙肝組(40例),男34例,女6例,平均年齡35.85歲(19~70歲);活動性肝炎肝硬化組(30例),男25例,女5例,平均年齡51.52歲(31~68歲);慢性重型肝炎組(26例),男23例,女3例,平均年齡40.69歲(26~59歲)。均為2007年8月至2008年1月濟南市傳染病醫(yī)院的住院患者,均符合2000年第十次全國病毒
3、性肝炎與肝病學術(shù)會議制定的診斷和分型標準。同時設(shè)立健康對照組(26例),來自濟南市傳染病醫(yī)院健康查體中心,其中男22例,女4例,平均年齡40.42歲(18~59歲)。采用實時熒光PCR檢測外周血淋巴細胞泛素mRNA的表達,以β-actin作為內(nèi)參。組間差異采用單因素方差分析。用電化學發(fā)光法定量檢測HBeAg和抗HBe;用熒光定量PCR檢測血清HBVDNA,對血清病毒學指標與泛素mRNA表達的關(guān)系進行分析。 結(jié)果: 1、慢
4、乙肝組、活動性肝炎肝硬化組、慢性重型肝炎組泛素mRNA的表達均明顯低于健康對照組(P=0.00)。 2、泛素mRNA的表達隨疾病發(fā)展逐漸降低,表達強度由高到低依次為慢乙肝組、活動性肝炎肝硬化組和慢性重型肝炎組。各組外周血淋巴細胞泛素mRNA表達量分別為健康對照的78.23%、70.34%、61.88%,慢乙肝組與慢性重型肝炎組表達量比較差異有顯著性(P<0.05)。 3、泛素mRNA的表達水平與患者HBeAg和HBV D
5、NA水平呈負相關(guān)(P<0.05),與抗HBe水平無相關(guān)性。 結(jié)論: 1、采用PCR相對定量、比較2^-△△CT法能有效地測定和評價外周血淋巴細胞泛素mRNA水平,方法簡單、可靠。 2、慢性HBV感染并有炎癥活動者均存在外周血淋巴細胞泛素mRNA表達不足,病情越重表達水平越低。 3、泛素mRNA表達水平與HBV復制相關(guān),病毒載量越高泛素mRNA表達水平越低。 4、外周血淋巴細胞泛素mRNA的異常表達
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