冬蟲夏草及其單體組分對大鼠骨質(zhì)疏松治療作用及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis,OP)是多種原因引起的一種以骨組織含量減少,骨的微觀結(jié)構(gòu)退化為特征,致使骨的脆性增加、強(qiáng)度降低而導(dǎo)致易于發(fā)生骨折的一種全身性骨骼疾病。骨質(zhì)疏松癥已經(jīng)不僅僅是一種疾病,目前已成為一個(gè)嚴(yán)重的社會問題。它帶來的最主要癥狀有劇烈的疼痛、多發(fā)骨折以及胸腔縮小引起的呼吸困難。在眾多承受骨質(zhì)疏松癥病痛折磨的患者中,絕經(jīng)后女性因受到衰老和體內(nèi)激素水平下降的雙重影響,成為了該病最大的受害人群,約占總患病人數(shù)70％以上

2、。另外,隨著糖尿病患者日漸增多,特別是中老年人居多,因糖尿病引起的骨質(zhì)疏松癥也成為目前臨床上骨質(zhì)疏松癥形成的重要原因之一,并且由于其具有隱匿性而往往被患者忽視,延誤治療,其后果不堪設(shè)想。目前防治骨質(zhì)疏松癥的藥物主要是骨吸收抑制劑、骨形成促進(jìn)劑和礦化藥物,這些藥物均屬替代治療,在長期使用過程中,這些藥物具有毒副作用大,靶向性低,依從性差等缺點(diǎn)。因此,有必要找尋到一種能夠具有廣泛受眾人群的藥物來治療骨質(zhì)疏松癥。
　　中藥的應(yīng)用在我國已

3、有幾千年的歷史,在人們心中具有極高的認(rèn)同度。中藥在治療骨質(zhì)疏松癥方面具有全身調(diào)理、毒副作用小、取材方便等優(yōu)勢,越來越受到人們的關(guān)注。而在眾多中藥中,冬蟲夏草特有的藥用價(jià)值長久以來一直受到人們的青睞。因此,如何發(fā)掘出冬蟲夏草的潛質(zhì),研發(fā)出具有自主知識產(chǎn)權(quán)的抗骨質(zhì)疏松中藥,成為了我們研究的目的所在。那么,冬蟲夏草是否具有預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥的能力呢?它發(fā)揮拮抗骨質(zhì)疏松作用的機(jī)制是什么?作為冬蟲夏草重要單體成分的蟲草多肽是否具有抗骨質(zhì)疏松的潛

4、力呢?我們將圍繞著上述疑問展開研究。
　　1.富含鍶的冬蟲夏草對去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠的作用及機(jī)制研究
　　(1)目的:研究富含鍶的冬蟲夏草對去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松的治療作用和相關(guān)機(jī)制。
　　(2)方法:將雌性大鼠隨機(jī)分為5組:假手術(shù)組(Sham)、去勢組(OVX)、冬蟲夏草組(CS)、鍶組(SR)以及富含鍶的蟲草組(CSS)。每組10只。4組通過手術(shù)摘除卵巢(OVX),另一組進(jìn)行假手術(shù)(對照)。第1組(假手術(shù))和第2組(OV

5、X)經(jīng)口接受10 ml生理鹽水治療,第3組、第4組和第5組分別經(jīng)口接受10 ml CSS、CS和SR治療,時(shí)間長達(dá)8周。觀察大鼠尿鈣、血鈣、血磷、骨礦物質(zhì)密度(BMD)、骨礦物質(zhì)含量(BMC)以及子宮、胸腺和體重的變化情況。測定各組大鼠血清堿性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、血清骨鈣素(OC)、同型胱氨酸(HCY)、I型膠原交聯(lián)型羧基端肽(CTX)、雌二醇和干擾素-γ(IFN-γ)水平。
　　(3)結(jié)果:CSS和

6、SR均對去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠的骨質(zhì)機(jī)械強(qiáng)度和礦物質(zhì)含量產(chǎn)生了積極的影響。但是,CSS治療組的股骨頸強(qiáng)度高于SR治療組。CSS和SR可顯著降低尿鈣、血鈣以及血磷水平。相反,CS和CSS可顯著增加萎縮子宮的重量和體重,并且還減輕動物胸腺質(zhì)量,而SR沒有表現(xiàn)出任何此類作用。同時(shí)CSS可以顯著降低血清ALP和TRAP水平并促進(jìn)骨鈣素的分泌并降低CTX水平。另外,CSS可以明顯降低IFN-γ水平并顯著提高體內(nèi)雌二醇的水平。
　　(4)結(jié)論:本

7、研究證明了富含鍶的冬蟲夏草在治療人類絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥中的價(jià)值。CSS可以有效治療因骨強(qiáng)度和骨礦含量下降引起的骨質(zhì)疏松癥,其作用機(jī)制主要是通過減少骨質(zhì)疏松模型中骨質(zhì)的流失,顯著減少骨吸收,促進(jìn)骨生成并促進(jìn)體內(nèi)雌二醇生成實(shí)現(xiàn)的。同時(shí)也證明了冬蟲夏草同樣具有拮抗骨質(zhì)疏松癥的潛力。
　　2.冬蟲夏草提取物對大鼠廢用性骨質(zhì)疏松的預(yù)防作用
　　(1)目的:驗(yàn)證冬蟲夏草是否具有預(yù)防大鼠廢用性骨質(zhì)疏松癥的作用。
　　(2)方法:將大鼠

8、隨機(jī)分為6組,其中5組做后肢懸吊(HLS)處理。其中1個(gè)HLS組經(jīng)口給予阿侖膦酸鈉(2.0 mg/kg/天),另外3個(gè)HLS組分別經(jīng)口給予不同劑量的冬蟲夏草(100、300、500 mg/kg/天),連續(xù)8周,余下的HLS組作為HLS之前和之后不給藥的對照組。每組分別由10只雄性和雌性組成。對體重、血清和尿液中的生化指標(biāo)、骨礦物質(zhì)密度(BMD)、骨礦物質(zhì)含量(BMC)、機(jī)械力學(xué)和骨微結(jié)構(gòu)進(jìn)行測定。
　　(3)結(jié)果:與其它HLS組相

9、比,使用較高劑量(300和500 mg/kg/天)冬蟲夏草或阿侖膦酸鈉的治療組在體重、機(jī)械強(qiáng)度、BMD和BMC等方面產(chǎn)生了積極作用。在HLS大鼠中,冬蟲夏草呈劑量依賴性地使骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物下降,并使骨鈣素水平升高。L-4椎體的顯微CT分析結(jié)果表明,冬蟲夏草高劑量組(500 mg/kg)大鼠的骨小梁無論是數(shù)目、厚度還是骨小梁的間隙都比HLS組得到了明顯的改善。
　　(4)結(jié)論:本研究表明,經(jīng)過8周使用較高劑量的冬蟲夏草可以預(yù)防大鼠廢用性

10、骨質(zhì)疏松癥。意味著冬蟲夏草也可以作為預(yù)防人類廢用性骨質(zhì)疏松癥的替代療法。
　　3.蟲草多肽對四氧嘧啶誘發(fā)的糖尿病大鼠骨質(zhì)疏松的作用研究
　　(1)目的:研究蟲草多肽對四氧嘧啶誘發(fā)的糖尿病大鼠骨質(zhì)疏松癥的保護(hù)作用及可能的機(jī)制。
　　(2)方法:將大鼠隨機(jī)分為5組,其中4組給予腹腔注射四氧嘧啶構(gòu)建糖尿病模型。3組糖尿病大鼠每天接受腹膜內(nèi)注射用蟲草多肽(Cordymin)(20,50,和100mg/Kg/天),共5周。余下的

11、糖尿病組對照組。每組分別由10只雄性大鼠組成。對血糖、糖化血紅蛋白(HbA1c)、血清堿性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、胰島素水平、總體抗氧化劑活性(TAOS)、骨礦物質(zhì)密度(BMD)、骨礦物質(zhì)含量(BMC)以及胰島β細(xì)胞損傷情況進(jìn)行測定和評估。
　　(3)結(jié)果:蟲草多肽可以降低血糖、糖化血紅蛋白(HbA1c)、血液中 ALP及 TRAP水平,并呈劑量依賴性的升高胰島素水平。此外,糖尿病大鼠經(jīng)過蟲草多肽的治療可

12、以相對減少胰腺β細(xì)胞的死亡并降低糖尿病大鼠總體抗氧化劑活性。同時(shí)可以增加糖尿病大鼠的BMC和BMD。
　　(4)結(jié)論:蟲草多肽對糖尿病引起的骨質(zhì)疏松癥可能具有一定的保護(hù)作用。
　　綜上所述:以上研究結(jié)果說明:冬蟲夏草能夠促進(jìn)成骨、降低骨質(zhì)流失,并且可以有效的修復(fù)了骨質(zhì)疏松對機(jī)體機(jī)能的損害。而作為冬蟲夏草中重要的單體成分之一的蟲草多肽可以有效緩解糖尿病癥狀,減輕胰腺β細(xì)胞損傷,有效拮抗體內(nèi)氧化劑的活性,增加體重,促進(jìn)體內(nèi)骨鈣的