飲食誘導胰島素抵抗和IL-6干預糖尿病大鼠肝組織chemerin的表達.pdf

1、目的：趨化素(chemerin)是一種新發(fā)現(xiàn)的脂肪細胞因子，由脂肪細胞分泌，促進脂肪細胞分化及葡萄糖轉運，在白色脂肪組織高表達。Chemerin是白細胞的趨化因子，通過旁分泌途徑作用于炎性反應細胞(如巨噬細胞)，從而對脂肪細胞及脂質代謝產生一系列影響，被確定是在肥胖和2型糖尿病中起重要作用的膜結合蛋白。Chemerin是否可以導致脂肪細胞局部、肝組織和全身的炎癥反應增強并對其它組織造成影響，是致炎因素還是抗炎因素，尚未明確。本研究主要是

2、采用原位雜交法觀察不同飲食誘導胰島素抵抗和IL-6干預糖尿病大鼠肝臟組織chemerin的表達情況及相關因素的影響，探討炎癥、脂代謝在肥胖、胰島素抵抗及2型糖尿病發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　 方法：將48只健康雄性SD大鼠隨機分成兩個亞組，共六組，體重247±4.9克，每組各8只。不同飲食誘導胰島素抵抗亞組分為三組：正常對照組(NOR組)8只，生理鹽水灌胃；飽和脂肪酸組(SFA組)8只，脂肪乳灌胃；反式脂肪酸組(TFA組)8只，人造

3、奶油灌胃。IL-6干預糖尿病亞組分為三組：糖尿病IL-6抗原組(A組)，8只；糖尿病IL-6抗體組(B組)，8只；糖尿病對照組(C組)，8只。每周稱重，灌胃量按1ml/100mg給予，均普通飼料喂養(yǎng)。至第7周末各組大鼠測定空腹血糖及血清胰島素，計算并比較各組胰島素水平，顯示脂肪乳灌胃實驗組(即SFA、TFA、A、B、C組)血清胰島素水平高于NOR組。于次日清晨稱取A、B、C組動物體重，按30mg/kg小劑量尾靜脈注射STZ造模。3天后血

4、糖測定結果大于16.7mmol/L為2型糖尿病造模成功。造模成功后第2天，A組給予IL-6抗原稀釋液(10ug/ml)腹腔注射0.6ml/d，連續(xù)干預5天；B組給予0.01M PBS液腹腔注射0.6ml/d，干預4天后，第5天IL-6抗體液(1mg/ml)腹腔注射0.6ml/d；NOR、SFA、TFA及C組均給予0.01 M PBS液腹腔注射0.6ml/d，連續(xù)干預5天。第8周末處死取材。動物處死前股動脈取血，測空腹血糖(FPG)、空腹

5、胰島素水平(FINS)、游離脂肪酸(FFA)、超敏C反應蛋白(hs-CRP)和血脂等指標。應用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定大鼠肝臟組織胰島素受體水平，原位雜交法檢測大鼠肝臟組織chemerin的表達情況。所有數(shù)據(jù)采用SSPS16.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。
　　 結果：脂肪乳灌胃7周后，SFA、TFA、A、B、C組大鼠體重均比喂養(yǎng)初期增加(均P<0.01)。與對照組相比，實驗組五組血清胰島素升高明顯，差異有統(tǒng)計學意義(均P<

6、0.05)，ISI明顯降低，HOMA-IR明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。STZ誘導后，2型糖尿病組大鼠全部成膜。喂養(yǎng)8周，實驗結束時，SFA、TFA組大鼠體重較喂養(yǎng)初期增加，A、B、C組大鼠體重較NOR組降低明顯(P<0.05)。血清FINS水平SFA、TFA、A、B、C組均高于NOR組(P<0.01)。FPG的測定A、B、C組高于NOR、SFA、TFA組(均P<0.01)，A、B組和C組之間沒有統(tǒng)計學意義。Hs-CRP的

7、測定SFA、TFA、A、B、C組均高于NOR組(P<0.05)。FFA的測定SFA、TFA、A、B、C組均高于NOR組(P<0.05)。SFA、TFA組的TG、TC、LDL水平較NOR明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。A、B、C三組的TG、TC、LDL水平較NOR升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。實驗組與NOR比較HDL水平均降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。肝細胞膜胰島素受體(InsR)的測定于SFA、TFA、A

8、、B、C組均高于NOR組(P<0.05)。大鼠肝組織chemerinmRNA的表達SFA、TFA、A、B、C組高于NOR組(均P<0.01)。Chemerin分別與HOME-IR(r=0.544，P<0.05).ISI(r=-0.544，P<0.05)、hs-CRP(r=0.575，P<0.05)、TG(r=0.7，P<0.05)、LDL-C(r=0.77，P<0.01)具有相關性。
　　 結論：(1)脂肪乳及人造奶油灌胃可以成

9、功造成胰島素抵抗模型，方法可靠，可以全部成模。反式脂肪酸誘導胰島素抵抗模型造模成功。(2)脂肪乳灌胃7周加小劑量一次尾靜脈注射STZ可以成功誘導SD大鼠的2型糖尿病模型，方法可靠，可全部成模。(3)胰島素抵抗和2型糖尿病大鼠肝細胞膜上的胰島素受體數(shù)目增多，可能與胰島素敏感性及作用下降有關。(4)血糖、胰島素、脂代謝以及炎癥反應等多因素對chemerin的表達有影響。發(fā)現(xiàn)chemerin在胰島素抵抗期高表達，2型糖尿病期表達下降，但仍較正