T-B淋巴細(xì)胞亞群在肥胖2型糖尿病患者胃旁路手術(shù)中的作用及臨床意義.pdf

1、隨著全球經(jīng)濟(jì)發(fā)展，糖尿病患病率飛速增加。上海交通大學(xué)的一項(xiàng)調(diào)查增加了我們的憂(yōu)慮。調(diào)查顯示，2010年我國(guó)糖尿病患病率已增加至11.6％，糖尿病總?cè)藬?shù)已高達(dá)9240萬(wàn)。因此可以預(yù)測(cè)我國(guó)衛(wèi)生醫(yī)療負(fù)擔(dān)將會(huì)在這方面面對(duì)很大壓力。此外，在世界許多國(guó)家，尤其是美國(guó)，肥胖人數(shù)增加，體力活動(dòng)減少以及老齡化進(jìn)一步增加了2型糖尿病的患病率。目前，盡管藥物治療不斷進(jìn)步，2型糖尿病患者用藥后的血糖達(dá)標(biāo)率實(shí)際不足40％，對(duì)于糖尿病合并癥的控制也不理想。而且，口服

2、降糖藥物和胰島素可能因?yàn)閷?dǎo)致增重而進(jìn)一步影響對(duì)機(jī)體代謝的控制，不僅如此，多藥物聯(lián)合治療既加重了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)也加重了器官損害。2型糖尿病，尤其是肥胖2型糖尿病患者的管理成為內(nèi)科治療中極具挑戰(zhàn)性的難題。
　　2009年美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)將一項(xiàng)新的糖尿病治療技術(shù)——手術(shù)治療肥胖2型糖尿病寫(xiě)入糖尿病指南。近幾年，經(jīng)過(guò)眾多臨床醫(yī)生驗(yàn)證，手術(shù)治療肥胖2型糖尿病患者的短期療效已經(jīng)得到肯定。這提升了人們對(duì)2型糖尿病治療新的期待，這可能是治愈糖尿病的

3、一條嶄新途徑。然而，手術(shù)治療肥胖2型糖尿病的機(jī)制仍然不清楚，這成為制約手術(shù)進(jìn)一步開(kāi)展和推廣的瓶頸。
　　有研究表明，肥胖是一種慢性亞臨床炎癥，同時(shí)2型糖尿病存在免疫細(xì)胞紊亂，促炎性分子如TNF-α可介導(dǎo)肥胖所致胰島素抵抗。而手術(shù)后肥胖2型糖尿病患者胰島素抵抗緩解。炎癥、胰島素抵抗和代謝手術(shù)之間的關(guān)系尚未可知。
　　目的：
　　本研究通過(guò)流式細(xì)胞分析技術(shù)并結(jié)合免疫細(xì)胞活性檢測(cè)技術(shù)，利用臨床接受腹腔鏡胃旁路手術(shù)患者的臨床標(biāo)

4、本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分析肥胖及2型糖尿病人群T/B淋巴細(xì)胞亞群的差異及CD4+T細(xì)胞的活性在術(shù)前術(shù)后的區(qū)別。并結(jié)合臨床相關(guān)指標(biāo)，分析其與有差異T/B淋巴細(xì)胞亞群的相關(guān)性，探討二者在手術(shù)治療肥胖及2型糖尿病過(guò)程中的作用及臨床意義。
　　方法：
　　一、回顧性分析26例腹腔鏡胃旁路手術(shù)患者與12例健康人組成的對(duì)照組，比較組間及各組手術(shù)前后T/B淋巴細(xì)胞亞群的差異
　　以2015年1月～2015年7月在我院代謝外科中心行代謝手術(shù)的2

5、6例腹腔鏡胃旁路手術(shù)患者進(jìn)行回顧性分析，其中肥胖2型糖尿病患者10例（肥胖糖尿病組），2型糖尿病患者8例（糖尿病組），肥胖癥患者8例（肥胖組）。于我院體檢門(mén)診隨機(jī)選取12例健康的體檢人員資料用作對(duì)照組，體檢人員均無(wú)嚴(yán)重心、肝、腎及腫瘤等疾病，無(wú)過(guò)敏性及變態(tài)反應(yīng)性疾病，未服用過(guò)糖皮質(zhì)激素及其它免疫抑制劑，并同時(shí)排除肥胖、2型糖尿病、感染及其他自身免疫系統(tǒng)可能異常的疾病。T/B淋巴細(xì)胞亞群分析采用MILLIPORE公司流式細(xì)胞儀(Guava

6、easyCyteHT型)操作。采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件中的單因素方差(one-wayANOVA)方法對(duì)不同組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，同組術(shù)前術(shù)后指標(biāo)比較采用配對(duì)-t檢驗(yàn)。
　　二、差異T/B淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)與患者營(yíng)養(yǎng)、糖脂代謝、腎功能指標(biāo)的相關(guān)性分析
　　以第一部分篩選出來(lái)的差異T/B淋巴細(xì)胞亞群指標(biāo)為研究對(duì)象，結(jié)合臨床手術(shù)前檢驗(yàn)評(píng)估指標(biāo)，包括營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)（白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白、前白蛋白）、糖代謝指標(biāo)（空腹血糖、餐后2小時(shí)血糖、糖

7、化血紅蛋白、空腹胰島素、餐后2小時(shí)胰島素、空腹C肽、餐后2小時(shí)C肽）、脂代謝指標(biāo)（甘油三脂、膽固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、載脂蛋白A1、載脂蛋白B）、腎功能指標(biāo)（尿素氮、肌酐、尿微量白蛋白、內(nèi)生肌酐清除率），組間比較采用單因素方差(one-wayANOVA)分析，相關(guān)性分析采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件中的Person相關(guān)分析和逐步回歸分析。
　　三、胃旁路手術(shù)患者CD4+T細(xì)胞活性變化
　　收集腹腔鏡胃旁路手術(shù)后患者及

8、術(shù)前患者血標(biāo)本（分為術(shù)前組和術(shù)后組），按第一部分中的方法選擇對(duì)照組。酶標(biāo)儀（Molecular Devices Spectra Max M3）檢測(cè)植物血凝集素(PHA)刺激下的CD4+T細(xì)胞活性。采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件中的多個(gè)獨(dú)立樣本的非參數(shù)檢驗(yàn)比較三組植物血凝集素(PHA)刺激下的CD4+T細(xì)胞活性在2h和18h的活性變化。
　　結(jié)果：
　　一、肥胖糖尿病組、糖尿病組、肥胖組和對(duì)照組中，B細(xì)胞絕對(duì)值(CD19/45)

9、
　　、B細(xì)胞(CD19+/45)的分布無(wú)差異(P＞0.05)。在四組中，糖尿病組和肥胖糖尿病組的輔助T細(xì)胞(CD4+/3)顯著高于對(duì)照組和肥胖組，糖尿病組和肥胖糖尿病組的CD4+/CD8+比率也顯著高于對(duì)照組，并且肥胖糖尿病組的CD4+/CD8+比率高于肥胖組(P＜0.05）。肥胖糖尿病組、糖尿病組和肥胖組中NK細(xì)胞(CD16+/56+/45)、NK細(xì)胞絕對(duì)值(CD16/56/45)均顯著低于對(duì)照組(P＜0.05）。
　　

10、二、肥胖糖尿病組中T細(xì)胞(CD3+)較術(shù)前有下降(69.43±6.52 vs66.89±7.74，t=2.282，P=0.048)，但下降的幅度不明顯。糖尿病組術(shù)后指標(biāo)較術(shù)前變化不大，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。肥胖組中，術(shù)后抑制T細(xì)胞絕對(duì)值(CD8/3)(853.25±360.55 vs718±303.06，t=2.49，P=0.042)、NK細(xì)胞絕對(duì)值(CD16/56/45)(391.5±113.47 vs332.38±97.58，t=2.9

11、11，P=0.023)較術(shù)前有不同程度的下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　三、在控制年齡、性別因素下，肥胖糖尿病組、糖尿病組、肥胖組患者在BMI、FPG、HbA1c、空腹胰島素、餐后2h C肽、高密度脂蛋白、尿素氮方面有顯著差異(P＜0.05)。
　　四、糖尿病組，CD4+/CD8+比率與尿微量白蛋白呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.857，P=0.006)，NK細(xì)胞(CD16+/56+/45)與肌酐呈負(fù)相關(guān)(r=-0.843，P=0.0

12、09)。肥胖糖尿病組，輔助T細(xì)胞(CD4+/3)與轉(zhuǎn)鐵蛋白、餐后2小時(shí)胰島素顯著負(fù)相關(guān)(r1=-0.772，P1=0.009; r2=-0.827，P2=0.003)，CD4+/CD8+比率與餐后2h胰島素顯著正相關(guān)(r=0.698，P=0.025)，與餐后2h C肽、載脂蛋白B、內(nèi)生肌酐清除率顯著負(fù)相關(guān)(r1=-0.810，P1=0.004; r2=-0.701，P2=0.024; r3=-0.761，P3=0.011），NK細(xì)胞(C

13、D16+/56+/45)與轉(zhuǎn)鐵蛋白、肌酐呈顯著正相關(guān)(r1=0.889，P1=0.001;r2=0.693，P2=0.026)，NK細(xì)胞絕對(duì)值與餐后2h胰島素、尿微量白蛋白顯著正相關(guān)(r1=0.700，P1=0.024;r2=0.634，P2=0.049)。肥胖組，CD4+/CD8+比率與餐后2小時(shí)血糖負(fù)相關(guān)(r=-0.731，P=0.039)，NK細(xì)胞絕對(duì)值與甘油三酯正相關(guān)(r=0.823，P=0.012)。
　　五、在年齡、性

14、別匹配下，手術(shù)前、手術(shù)后與對(duì)照組，PHA刺激下的CD4+T細(xì)胞活性增加率在2h及18h均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。術(shù)前組與對(duì)照組在PHA刺激下的CD4+T細(xì)胞活性增加率18h顯著高于2h(P＜0.05)，術(shù)后組在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)上的變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　一、2型糖尿病或肥胖糖尿病人群中，免疫系統(tǒng)被激活，全身處于一種微炎癥狀態(tài)，肥胖及T2DM患者存在免疫系統(tǒng)組分的改變即外周血中的T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量、