注射用丹參酚酸治療缺血性中風(fēng)的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制研究.pdf

1、注射用丹參總酚酸是天士力集團(tuán)研制的治療缺血性腦血管病一種中藥新藥，主要成分為丹參經(jīng)現(xiàn)代提取工藝得到的水溶性酚酸類成分，在治療急性腦缺血方面具有良好的臨床療效，但其治療物質(zhì)基礎(chǔ)及機(jī)理研究尚不夠深入。為了明確其治療急性腦缺血的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)理，本研究引入整合化學(xué)物質(zhì)組學(xué)的整體系統(tǒng)生物學(xué)研究思路及技術(shù)，對(duì)其進(jìn)行了化學(xué)成分、基因、代謝等不同水平上的研究。
　　 首先我們采用化學(xué)物質(zhì)組學(xué)(Chemomics)的研究思路，對(duì)其化學(xué)成分

2、進(jìn)行系統(tǒng)的研究。利用超高效液相色譜串聯(lián)二極管陣列檢測(cè)器(UPLC/DAD)構(gòu)建了注射用丹參總酚酸的指紋圖譜，并采用超高效液相色譜-電噴霧離子源-四極桿/飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-ESI-Q/TOF)分別對(duì)指紋圖譜中的14個(gè)共有指紋峰進(jìn)行了定性分析。本方法可用于綜合評(píng)價(jià)注射用丹參總酚酸的整體質(zhì)量，為藥物的質(zhì)量評(píng)價(jià)和控制提供了科學(xué)依據(jù)。
　　 其次，我們利用基因組學(xué)研究思路，采用博奧大鼠全基因組表達(dá)譜芯片，對(duì)丹參總酚酸治療局灶性腦

3、缺血大鼠缺血腦組織基因表達(dá)譜的影響進(jìn)行了研究，從基因角度系統(tǒng)探討其防治急性腦缺血缺血的作用機(jī)制。結(jié)果顯示丹參總酚酸可以通過調(diào)控急性腦缺血大鼠466條基因，47條通路防治腦缺血損傷，涉及能量代謝、細(xì)胞凋亡、粘附因子表達(dá)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，細(xì)胞通訊等多個(gè)方面。
　　 同時(shí)本研究以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液為研究對(duì)象，測(cè)定不同組間動(dòng)物內(nèi)源性代謝產(chǎn)物的變化情況，采用主成分分析法對(duì)所獲得的代謝組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，并對(duì)潛在的生物標(biāo)記物依次采用TOF-MS精確分子量

4、測(cè)定、匹配分子式、數(shù)據(jù)庫(kù)檢索、文獻(xiàn)對(duì)照方式進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明，有18個(gè)化合物對(duì)分類貢獻(xiàn)比較顯著，即潛在的生物標(biāo)志物。這些物質(zhì)均為溶血磷脂酰膽堿(Lyso-PC)類和脂肪酸類化合物，這說明脂質(zhì)代謝（包括磷脂和脂肪酸代謝）紊亂很可能是造成腦缺血損傷后代謝異常的主要原因。
　　 同時(shí)我們還通過反向藥效團(tuán)匹配方法，對(duì)丹參總酚酸成分與其作用通路進(jìn)行模擬匹配，確定了潛在的藥物靶標(biāo)188個(gè)及作用通路28條。結(jié)合以上對(duì)藥物基因、代謝不同水平上的