壽爾智膠囊對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠海馬組織BDNF、TrKB基因及蛋白表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：
　　 觀察AD模型大鼠行為學(xué),海馬組織形態(tài)學(xué)及BDNF、TrKB基因和蛋白表達(dá)的變化。探討海馬神經(jīng)元損傷與AD的關(guān)系,以及壽爾智膠囊對(duì)上述變化的保護(hù)機(jī)制。
　　 方法：
　　 隨機(jī)將40只健康雄性SD大鼠分成假手術(shù)組、模型組、壽爾智組、安理申組,每組10只;采用小動(dòng)物腦立體定位儀,經(jīng)大鼠海馬體表投影位置向海馬CA1區(qū)注射聚集態(tài)Aβ25-35構(gòu)建AD模型大鼠;造模3天后,壽爾智組給予壽爾智膠囊灌胃,安理申組

2、給予安理申灌胃,模型組與假手術(shù)組給予等體積生理鹽水灌胃;治療四周后,運(yùn)用Morris水迷宮測(cè)試大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力;結(jié)束后,用HE染色觀察大鼠海馬CA1區(qū)組織形態(tài)學(xué);免疫組化染色測(cè)定大鼠海馬CA1區(qū)BDNF及其受體TrkB的表達(dá);Real-timeQuantitative PCR法測(cè)定大鼠海馬組織BDNF mRNA、TrKB mRNA的表達(dá),并觀察壽爾智膠囊對(duì)上述指標(biāo)的影響。
　　 結(jié)果：
　　 1.學(xué)習(xí)記憶能力測(cè)試:定

3、位航行試驗(yàn)中,各組大鼠5天的平均逃避潛伏期都有所下降,假手術(shù)組、壽爾智組和安理申組三組大鼠都較模型組明顯縮短(P＜0.05或P＜0.01);壽爾智組、安理申組與假手術(shù)組三組之間比較差異均不顯著(P＞0.05)。空間探索試驗(yàn)中,以各組大鼠在原平臺(tái)象限活動(dòng)時(shí)間和穿越原平臺(tái)次數(shù)為指標(biāo),假手術(shù)組、壽爾智組和安理申組三組大鼠都較模型組明顯增加(P＜0.05或P＜0.01);壽爾智組、安理申組與假手術(shù)組三組之間比較差異均不顯著(P＞0.05)。

4、r>　　 2.大鼠海馬組織HE染色:模型組大鼠海馬CA1區(qū)細(xì)胞結(jié)構(gòu)紊亂,數(shù)目明顯減少,排列不整齊;壽爾智組、安理申組和假手術(shù)組三組大鼠海馬CA1區(qū)細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整,排列整齊,但前兩者較后者在海馬CA1區(qū)細(xì)胞結(jié)構(gòu)、數(shù)目、排列上都稍差。
　　 3.大鼠海馬組織石蠟切片免疫組化染色:以各組大鼠海馬CA1區(qū)BDNF、TrKB陽(yáng)性細(xì)胞平均光密度為觀察指標(biāo),假手術(shù)組、壽爾智組和安理申組三組大鼠都較模型組明顯增加,胞漿染色較深,差異有顯著性(P

5、＜0.01);壽爾智組和安理申組與假手術(shù)組大鼠比較明顯減少,胞漿染色稍淡,差異有顯著性(P＜0.01);壽爾智組與安理申組比較差別不顯著(P＞0.05)。
　　 4.大鼠海馬組織BDNF、TrKB基因的測(cè)定:各組大鼠海馬組織BDNFmRNA、TrKB mRNA的表達(dá),假手術(shù)組、壽爾智組和安理申組三組都較模型組明顯增加(P＜O.05);壽爾智組和安理申組仍低于假手術(shù)組(P＜0.05);壽爾智組較安理申組差別不明顯(P＞0.05)。

6、
　　 結(jié)論：
　　 1.大鼠雙側(cè)海馬注射Aβ25-35構(gòu)建的AD模型穩(wěn)定可靠,重復(fù)性好。
　　 2.AD模型大鼠學(xué)習(xí)和記憶功能障礙的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)可能是海馬神經(jīng)元等結(jié)構(gòu)的損傷和丟失。
　　 3.壽爾智膠囊有補(bǔ)腎填精,活血祛瘀,化痰開(kāi)竅之功效,其對(duì)AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的改善作用可能與其在一定程度上抑制Aβ25-35在大鼠腦內(nèi)的沉積,減輕對(duì)海馬神經(jīng)元的毒性損傷有關(guān)。
　　 4.AD模型大鼠海馬神經(jīng)元