尿毒癥毒素對腸上皮細胞屏障的損害作用及機制研究.pdf

1、＼＼惻必荊＼Y3391512中圖分類號：R69；R57；R37西南巨斜大粵SOUTHWESTMEDICALUNIVERSITY碩士學(xué)位論文——————————————————————————————————————————一尿毒癥毒素對腸上皮細胞屏障的損害作用及機制研究二。一八年五月西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文尿毒癥毒素對腸上皮細胞屏障的損害作用及機制研究摘要第一部分：尿毒癥血清對腸上皮細胞屏障結(jié)構(gòu)及功能的影響目的：觀察尿毒癥患者血清對腸上

2、皮細胞屏障結(jié)構(gòu)及功能的影響，為探究尿毒癥環(huán)境直接導(dǎo)致腸道功能障礙提供理論基礎(chǔ)及思路。方法：分別收集尿毒癥患者及健康志愿者空腹血，檢測肌酐、尿素、尿酸等重要生化指標；以Caco2細胞為研究對象，用CCK8檢測10％、20％、30％、40％健康血清及尿毒癥血清在24、48、72h的時間梯度下對細胞增殖活性影響，篩選出最佳血清濃度及最適作用時間。將Caco一2細胞按空白對照組、健康組、尿毒癥組分組培養(yǎng)，以免疫熒光法檢測緊密連接蛋白ZO一1、O

3、ccludin、Claudin一1分布及形態(tài)變化，以免疫印跡法檢測上述蛋白的表達水平；建立Caco2細胞單層模型，通過光學(xué)顯微鏡觀察形態(tài)、堿性磷酸酶試劑盒檢測堿性磷酸酶活性、熒光素鈉檢測通透性以驗證單層模型是否建立成功；將Caco一2細胞單層模型分為空白對照組、健康組、尿毒癥組分組培養(yǎng)，采用熒光素鈉透過實驗檢測各組模型的屏障功能。結(jié)果：(1)與健康自愿者相比較，尿毒癥患者血清肌酐、尿素、尿酸明顯升高(尸O01)。(2)相較同濃度血清的健