基于基因芯片研究漢黃芩素抗腫瘤作用機制.pdf

1、近年來的研究表明，從黃芩根中分離出的一種植物源黃酮類化合物漢黃芩素，能有效地抑制多種腫瘤細胞生長，是一種非常有前途的、具有多靶點的潛在抗腫瘤藥物。但漢黃芩素抗腫瘤機制較為復雜，至今仍未完全闡明。本實驗中，我們發(fā)現(xiàn)，漢黃芩素在一定濃度范圍(12.5～200μmol/L)對胃癌細胞SGC-7901和肝癌細胞Huh7生長沒有顯著的抑制作用，而能顯著地抑制肝癌細胞HepG2增殖，且呈時間和劑量依賴性。漢黃芩素作用于HepG2細胞48 h后的IC

2、50值為115.7μmol/L。應用流式細胞技術檢測漢黃芩素對肝癌細胞HepG2凋亡及周期的影響，結果發(fā)現(xiàn)漢黃芩素能阻滯細胞G1，抑制S期的DNA合成，而促進細胞凋亡;0、50、100、200μmol/L漢黃芩素作用于細胞48 h后的凋亡率(％)分別為2.58±0.07，4.04±0.15，9.54±0.14，27.33±0.12。細胞劃痕實驗和Transwell小室法結果表明漢黃芩素(50～200μmol/L)能抑制肝癌細胞HepG2

3、遷移作用。這些研究結果證實了漢黃芩素有明顯的抗腫瘤作用。我們應用Affymetrix HG-u133Plus2.0全人類基因表達譜芯片，檢測漢黃芩素作用于肝癌細胞HepG248 h后的基因表達差異。結果篩出406個差異表達明顯的基因（上調或下調倍數(shù)大于2），其中295個基因上調，111個基因下調。在6次比較中，差異倍數(shù)均明確達4倍以上的上調基因12條，如FAM129A，INHBE，GDF15等;差異倍數(shù)均達4倍以上的下調基因8條，包括C

4、ox-1，H19等。利用生物注釋數(shù)據(jù)據(jù)庫Gene Ontology(GO)對406個差異基因功能聚類分析共有148個功能類別。利用KEGG數(shù)據(jù)庫對這些差異基因進行通路分析，共涉及61條生物學通路。包括細胞凋亡、腫瘤發(fā)生、代謝、信號轉導、細胞周期、物質運輸?shù)榷鄠€生物過程。其中顯著變化的通路是細胞周期和MAPK信號通路。細胞周期通路中GADD45α，CDKN1A，CDKN2B基因上調，MAPK通路的MAP4K4基因上調，ARPB1，JUN，