白細胞介素-10在慢性乙型肝炎患者中的表達及其意義.pdf

1、背景與目的：
　　乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus，HBV)嚴重威脅人類健康。全球大約有3.5-4.0億慢性HBV毒攜帶者。盡管乙型肝炎疫苗的問世，每年仍有5000萬例新感染乙型肝炎患者。絕大部分成年的HBV感染者具有自限能力，有5％至10％患者可發(fā)展為慢性感染。同時有15％至40％慢性乙型肝炎患者在其一生疾病的進展中將會發(fā)生嚴重的并發(fā)癥。慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)感染的自然病史

2、是一個動態(tài)過程，根據(jù)宿主免疫反應狀態(tài)的不同可將CHB的自然史分為四個階段:免疫耐受(Immune tolerant，IT)期，免疫清除(Immune clearance，IC)期，低復制(Low or no-repliicative，LR)期，再活動期;再活動期也被稱為HBeAg陰性的慢性乙型肝炎(HBeAg Negative Hepatitis，ENH)。關于乙型肝炎慢性化的具體機制仍不清楚，有效的T細胞應答對病毒的清除起到重要作用，

3、異常免疫應答不利于病毒清除。白細胞介素(Interleukin，IL)-10是一種免疫和炎癥抑制因子，可參與Th2型細胞免疫反應。有研究表明IL-10的表達上調與T細胞反應應答抑制有關，并可以導致HBV感染的慢性化。本研究通過檢測CHB患者外周血單個核細胞及血漿中IL-10及其相關細胞因子IL-6和腫瘤壞死因子(tumornecrosis factor，TNF)-α的表達水平，進而探討IL-10在慢性乙型肝炎免疫分期進展中的作用及臨床意

4、義。
　　方法：
　　采用回顧性方法共納入CHB患者197例，其中免疫耐受期40例、免疫清除期97例、低復制期26例和再活動期34例，選擇18例健康志愿者為正常對照。酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme-linked ImmunosorbentAssay，ELISA）檢測每位研究對象血漿IL-10、IL-6和TNF-α水平，實時熒光定量聚合酶鏈式反應(Real-timePolymerase Chain Reaction，RT-PCR

5、)方法檢測每位研究對象外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中IL-10、IL-6和TNF-α的mRNA水平。采用SPSS22.0進行統(tǒng)計學分析，非正態(tài)分布的連續(xù)型數(shù)據(jù)資料以中位數(shù)和四分位間距(M[P25，P75])表示;Kmskal-Wallis H檢驗和Mann-WhitneyU檢驗用于組間比較。Spearman秩和相關分析用于相關分析。P＜0.05時被認為差異具有統(tǒng)計學

6、意義。
　　結果：
　　1.CHB患者血漿和PBMCs中IL-10水平較正常對照組明顯上調（P＜0.05）。我們根據(jù)HBeAg和HBVDNA陽性與否分組，分析血漿IL-10水平和PBMCs IL-10mRNA水平的表達。HBeAg陽性組患者血漿IL-10水平明顯高于HBeAg陰性組（Z=-2.591，P=0.01）。而HBVDNA陽性和HBVDNA陰性的CHB患者PBMCs中IL-10mRNA水平和血漿IL-10水平無明顯統(tǒng)

7、計學差異(Z=-1.915，P=0.099;Z=-1.648，P=0.055)。
　　2.CHB患者血漿和PBMCs中IL-10相關細胞因子IL-6、TNF-α表達水平均也顯著高于正常對照組（P＜0.05）。CHB患者PBMCs中IL-10 mRNA與IL-6 mRNA水平呈明顯正相關(r=0.344，P＜0.01)，和TNF-α mRNA呈明顯負相關（r=-0.298，P＜0.01）。CHB患者血漿IL-10水平與IL-6蛋白水

8、平呈明顯正相關(r=0.514，P＜0.01)，和血漿TNF-α蛋白呈明顯負相關(r=-0.363，P＜0.01)。
　　3.CHB患者IL-10 mRNA及蛋白濃度水平與血清ALT呈明顯正相關（r=0.392，P＜0.01;r=0.264，P＜0.01)，與血清AST水平呈明顯正相關（r=0.290，P＜0.01;r=0.184，P=0.01）。
　　4.IL-10蛋白濃度及mRNA水平在不同免疫分期組中有明顯統(tǒng)計學意義（

9、P＜0.001)。在蛋白水平，免疫清除期患者血漿IL-10水平明顯高于免疫耐受期（P＜0.05）和低復制期（P＜0.05）。在基因水平，免疫清除期PBMCs中IL-10mRNA明顯高于免疫耐受期(P＜0.001)和低復制期（P＜0.05），再活動期PBMCsIL-10mRNA明顯高于免疫耐受期(P=0.01）。Kruskal-Wallis H檢驗分析IL-6及TNF-α在各免疫分期中沒有明顯差異。
　　結論：
　　免疫清除期