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1、(R)-2-羥基-4-苯基丁酸乙酯[(R)-EHPB]是合成多種血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑的重要手性中間體。本研究通過篩選獲得了一個催化能力較高的酮還原酶KE1,研究了其酶學(xué)性質(zhì)。研究表明:KE1在pH6.0和50℃時,具有最佳的反應(yīng)活性;在20℃較穩(wěn)定,30℃和40℃半衰期較短,分別為6h和1h;在2mL水相反應(yīng)體系中,利用含有KE1和葡萄糖脫氫酶(GDH)的全細胞,催化還原EOPB,可以在不額外添加NAPDH的情況下,將10
2、mM EOPB完全轉(zhuǎn)化(轉(zhuǎn)化率>99%,ee>99%);將底物濃度提高到30 mM時,反應(yīng)12h后轉(zhuǎn)化率只有38.3%,該酶的穩(wěn)定非常低,因此對其進行基因改造。
(R)-3-羥基丁酸乙酯[(R)-EHB]作為一種手性中間體,用來制備許多手性藥物。EHB通過酯交換縮聚得到的聚3-羥基丁酸乙酯(PHB)可以用來治理白色污染。實驗篩選獲得了一個酮還原酶KE31,對乙酰乙酸乙酯顯現(xiàn)出較好的催化性能,在pH7.0時有最適活性,在30
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