低氧誘導(dǎo)因子1α介導(dǎo)大鼠心肌缺血后適應(yīng)的保護(hù)作用.pdf

1、目的:建立大鼠在體的心肌缺血后適應(yīng)的模型，應(yīng)用建立的模型通過(guò)測(cè)定多個(gè)指標(biāo)，研究缺血后適應(yīng)對(duì)心肌的保護(hù)作用，探討低氧誘導(dǎo)因子1a(HIF-1a)在心肌缺血后適應(yīng)中心肌保護(hù)的作用及機(jī)制。
　　方法:健康的SD成年大鼠40只(SPF級(jí)，由遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司提供)，體重（314±4.8）g，雌雄不限。40只大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只。A組為對(duì)照組，只在冠狀動(dòng)脈前降支穿線，不結(jié)扎;B組為缺血再灌注組，阻斷冠狀動(dòng)脈前降支45分鐘，后再

2、灌注3小時(shí);C組為缺血后適應(yīng)組，阻斷冠狀動(dòng)脈前降支45分鐘，后在再灌注瞬間實(shí)施再灌注10秒-缺血10秒，共3個(gè)循環(huán)的干預(yù)，隨后再灌注3小時(shí)。D組缺血后適應(yīng)+HIF-1a抑制劑組，阻斷冠狀動(dòng)脈前降支45分鐘后，腹腔注射低氧誘導(dǎo)因子1a抑制劑(AG490)3ug/g，后給予與C組相同的后適應(yīng)操作。大鼠成功氣管插管后，在右側(cè)股靜脈留置靜脈通路并作肝素化處理。在結(jié)扎冠脈前降支前，缺血45分鐘后，再灌注3小時(shí)后三個(gè)時(shí)間點(diǎn)在股靜脈處采血0.5毫升，

3、分別測(cè)定血清中的肌酸激酶、肌鈣蛋白含量;再灌注3小時(shí)后取大鼠心臟用TTC染色法測(cè)定梗死心肌的面積;用Western Blot方法測(cè)定組織中低氧誘導(dǎo)因子1a(H1F-1a)在各組中的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:1、心電圖的變化A組SD大鼠在正常開(kāi)胸狀態(tài)下，僅偶爾出現(xiàn)室性早搏，B、C、D組結(jié)扎后及再灌注時(shí)均出現(xiàn)以下心電圖表現(xiàn):結(jié)扎冠狀動(dòng)脈后，R波增高、變寬，伴ST段抬高，伴有心律失常（包括室性早搏及短陣室性心動(dòng)過(guò)速），再灌注后表現(xiàn)為增高的R

4、波振幅回落，抬高的ST段下降，并伴有室早等心律失常，隨再灌注時(shí)間延長(zhǎng)，心律失常逐漸消失。
　　2、血清肌酸激酶的含量測(cè)定結(jié)扎前四組間提示無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。缺血45分鐘后，A組以外的三組肌酸激酶(CK)均較前升高，表現(xiàn)為B、C、D組含量都顯著高于A組(P＜0.01)，而B、C、D組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);再灌注3小時(shí)后，B、C、D組肌酸激酶(CK)較缺血后升高，其中B組含量高于A組(P＜0.01)，B組含量高于C組(P＜0.05

5、)，D組含量高于C組(P＜0.05)，B組與D組之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　3、血清肌鈣蛋白含量的測(cè)定結(jié)扎前四組間提示無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。缺血45分鐘后，A組以外的三組肌鈣蛋白均較前升高，表現(xiàn)為B、C、D組含量都顯著高于A組(P＜0.01)，而B、C、D組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);再灌注3小時(shí)后，B、C、D組肌鈣蛋白較缺血后升高，其中B組、D組含量均高于C組(P＜0.05)，而B組與D組之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0

6、.05)。
　　4、心肌梗死面積測(cè)定B、C、D組心肌梗死面積均顯著大于A組(P＜0.01);B、D組顯著大于C組(P＜0.05);B組與D組比較梗死面積無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　5、心肌組織中缺氧誘導(dǎo)因子1a的表達(dá)A組的HIF-1a蛋白微量表達(dá);B組HIF-1a蛋白表達(dá)高于A組(P＜0.05);C組HIF-1a蛋白顯著高于B組(P＜0.05);D組HIF-1a蛋白幾乎不表達(dá);
　　結(jié)論：缺血后適應(yīng)增加HIF-