春石斛蘭品種的倍性鑒定及RAPD分子遺傳圖譜的構建.pdf

1、本研究采用染色體計數(shù)和流式細胞儀測定兩種方法，對春石斛品種的倍性進行了鑒定，并以044(.Dendrobium L,ucky Gal‘Emito’)(母本)與051(D.Fantasy‘Crown’)(父本)的F<,1>代90株為作圖材料，利用RAPD標記，圍繞春石斛分子遺傳圖譜的構建，進行了春石斛RAPD反應體系優(yōu)化和RAPD標記分離分析等方面研究，并初步最終構建了春石斛分子遺傳圖譜。 主要結果如下： 1、春石斛的倍性

2、鑒定 利用DNA流式細胞儀測定法鑒定了53個由日本引進的春石斛栽培品種和26個國產(chǎn)原生種的染色體倍性。結果表明，待測品種植株中有二倍體、三倍體及二倍體加四倍體、三倍體加六倍體和四倍體加八倍體等嵌合體。利用染色體制片法鑒定了17個栽培種和4個原生種的倍性，待測品種植株中不僅有二倍體、三倍體和四倍體，而且還可能有二倍體加四倍體的嵌合體。比較這兩種植株倍性鑒定方法，流式細胞儀光度術測定細胞核DNA含量，試樣制備簡單，測量快速，精度高，

3、因此是進行倍性鑒定的理想方法之一，其鑒定結果與染色體計數(shù)結果有所不同，但是可以作為染色體計數(shù)方法的有效參照。染色體計數(shù)法雖然操作過程比較繁瑣，但卻是最可靠、最直接的鑒定方法。 2、作圖群體RAPD多態(tài)性分析 從420個RAPD隨機引物中篩選獲得在雙親間存在多態(tài)性的引物90個，多態(tài)性比例為21.4％。用篩選出的90個隨機引物對F<,1>群體進行多態(tài)性分析，共獲得穩(wěn)定的多態(tài)性帶型215個。經(jīng)卡方檢測，獲得的215個RAPD多