ABCG2在肺癌中的表達(dá)及其對(duì)肺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文ABCG2在肺癌中的表達(dá)及其對(duì)肺癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名：牛海艷申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：申洪20080415中文摘要胞。目前認(rèn)為A B C G 2 就是S P 細(xì)胞的表型標(biāo)志，是潛在的干細(xì)胞標(biāo)志物。因此，A B C G 2 既是一個(gè)新的耐藥基因，又和S P 細(xì)胞、腫瘤干細(xì)胞密切相關(guān)，研究其在肺癌中的表達(dá)，分析其與臨床病理特征的關(guān)系，揭示其對(duì)肺癌細(xì)胞基本生物學(xué)特性的影響，有助于深入研究

2、A B C G 2 與肺癌的關(guān)系，可能會(huì)為肺癌的發(fā)生和防治提供新策略。方法1 ．A B C G 2 在肺癌中表達(dá)的定量研究( 1 ) 應(yīng)用免疫組化( S P 法) 觀察了8 6 例肺癌( 鱗癌4 2 例、腺癌3 1 例、大細(xì)胞癌5 例，小細(xì)胞癌8 例，其中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者3 3 例) 和2 4 例癌周肺組織( 距腫物5 c m ) A B C G 2 蛋白的表達(dá)：( 2 ) 應(yīng)用原位雜交觀察了8 6 例肺癌組織中( 鱗癌4 2 例、腺癌3

3、 1 例、大細(xì)胞癌5 例，小細(xì)胞癌8 例) A B C G 2 m R N A 的表達(dá)：( 3 ) 應(yīng)用顯微圖像定量分析，測(cè)試靶細(xì)胞A B C G 2 蛋白及m R N A 表達(dá)的陽(yáng)性單位( P U ) 值。2 ．A B C G 2 基因沉默對(duì)肺癌細(xì)胞體外生物學(xué)特性的影響( I ) 在倒置顯微鏡下觀察肺腺癌細(xì)胞G L C ．8 2 和A 5 4 9 的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)；應(yīng)用H E 細(xì)胞爬片和組織切片比較二者形態(tài)異同；應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞原位

4、雜交、R T - 熒光定量P C R 、w e s t e r n —b l o t 和H o e c h s t 3 3 3 4 2 染色比較G L C ．8 2 和A 5 4 9 中A B C G 2 基因表達(dá)程度。( 2 ) 應(yīng)用基因轉(zhuǎn)染方法，將含有不同片段的4 個(gè)干擾質(zhì)粒、一個(gè)陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒和一個(gè)陰性對(duì)照質(zhì)粒，通過(guò)脂質(zhì)體分別轉(zhuǎn)入G L C ．8 2 ，用G 4 1 8 反復(fù)篩選純化克隆。用R T - P C R 法鑒定陽(yáng)性對(duì)照中G