野菊花保肝微丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及野菊花黃色素提取分離工藝研究.pdf

1、野菊花具有清熱解毒、清肝明目的功效，課題組前期通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)了一個(gè)抗乙肝病毒、肝保護(hù)雙功效的活性部位FCI-B，并研制成了野菊花保肝微丸，本論文主要對(duì)野菊花保肝微丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了研究。同時(shí)我們以黃酮類(lèi)化合物蒙花苷和倍半萜類(lèi)化合物豚草素A為指標(biāo)成分，對(duì)野菊花藥材進(jìn)行定性定量的實(shí)驗(yàn)研究，提高野菊花現(xiàn)有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；此外，又對(duì)乙醇提取后的野菊花殘?jiān)悬S色素提取分離工藝進(jìn)行研究，有效、合理、全面地利用中藥資源。
　　野菊花保肝微丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

2、研究中，我們選擇了黃酮類(lèi)化合物蒙花苷、刺槐素，倍半萜類(lèi)化合物豚草素A、野菊花內(nèi)酯為指標(biāo)成分，薄層色譜法（TLC）對(duì)該四個(gè)指標(biāo)成分進(jìn)行定性分析，薄層色譜特征明顯。利用高效液相（HPLC）雙波長(zhǎng)（203 nm、340 nm）的方法，同時(shí)測(cè)定蒙花苷、刺槐素、豚草素A和野菊花內(nèi)酯的含量，分別為0.013％、0.063%、0.44%、0.50%。利用HPLC法研究該保肝微丸的指紋圖譜，確定了14個(gè)共有峰并指認(rèn)出7個(gè)，進(jìn)行相似度計(jì)算，相似度良好。氣

3、相色譜法對(duì)微丸的溶劑殘留、農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，乙醇、乙酸乙酯的溶劑殘留量分別為0.04%、0.02%，γ-BHC，p, pˊ-DDT的農(nóng)藥殘留量為0.0012 mg/kg、0.003 mg/kg，其他農(nóng)藥未被檢出，溶劑殘留和農(nóng)藥殘留均符合藥典規(guī)定。還對(duì)該微丸進(jìn)行了重金屬檢測(cè)（第二法）和水分測(cè)定（烘干法），未檢測(cè)到重金屬，含水量為1.5%，符合藥典規(guī)定。通過(guò)薄層鑒別、含量測(cè)定、指紋圖譜、溶劑殘留等實(shí)驗(yàn)，對(duì)該微丸的質(zhì)量進(jìn)行有效地控制，制定野菊

4、花保肝微丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案。
　　2015版《中國(guó)藥典》中野菊花藥材的質(zhì)量控制僅測(cè)定了蒙花苷的含量，課題組前期研究發(fā)現(xiàn)野菊花活性部位 FCI-B中倍半萜類(lèi)起主要的抗病毒作用，而且倍半萜類(lèi)化合物豚草素 A隨著野菊花藥材品質(zhì)的不同而不同，因此我們認(rèn)為野菊花藥材質(zhì)量控制的指標(biāo)成分應(yīng)增加倍半萜類(lèi)成分。野菊花藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中，采用TLC法對(duì)蒙花苷和豚草素A進(jìn)行定性分析，薄層色譜特征明顯；HPLC測(cè)定不同產(chǎn)地野菊花藥材中蒙花苷和豚草素 A的

5、含量，南陽(yáng)、濟(jì)源、信陽(yáng)、山東、安徽五個(gè)產(chǎn)地蒙花苷的含量分別為6.24%、5.02%、6.53%、4.79%、6.19%，豚草素A的含量分別為0.66%、0.75%、0.81%、0.47%、0.61%。結(jié)果表明不同產(chǎn)地野菊花藥材均含有蒙花苷和豚草素A，二者含量有所不同。本研究首次建立野菊花藥材不同類(lèi)指標(biāo)成分的薄層色譜和高效液相含量測(cè)定綜合評(píng)價(jià)方法，方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、重復(fù)性好。研究表明蒙花苷和豚草素 A含量能夠反映野菊花藥材的品質(zhì)質(zhì)量，為提高

6、野菊花現(xiàn)有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了科學(xué)的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　野菊花黃色素的提取分離工藝研究中，我們通過(guò)對(duì)提取次數(shù)、料液比設(shè)計(jì)兩因素三水平的正交試驗(yàn)，利用組織破碎法對(duì)黃色素的提取工藝進(jìn)行研究；對(duì)濃縮比例、加水濃度設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，利用沉淀法對(duì)黃色素的分離工藝進(jìn)行研究。最終確定野菊花黃色素的最佳提取分離工藝為：提取次數(shù)為3次，料液比為1:10，濃縮比例為1/2，加水濃度為10%。該工藝放大實(shí)驗(yàn)中，得野菊花總黃色素60.19 g，得率為1.2%，結(jié)果表