百草枯中毒患者血中濃度與缺氧誘導(dǎo)因子-1α相關(guān)性的研究.pdf

1、目的：
　　探討缺氧誘導(dǎo)因子-1α在百草枯致肺纖維化中的作用及其血中的水平與血漿百草枯濃度的相關(guān)性。
　　方法：
　　體外培養(yǎng)RLE-6TN細(xì)胞，制備百草枯中毒體外模型，采用不同濃度的百草枯處理細(xì)胞，檢測(cè)細(xì)胞存活率，選擇恰當(dāng)?shù)陌俨菘萏幚頋舛取７譃閷?duì)照組、染毒組和干預(yù)組，通過(guò)Lipo2000轉(zhuǎn)染HIF-1αsiRNA沉默HIF-1α，收集細(xì)胞，行qPCR、Western blot及免疫熒光檢測(cè)相關(guān)蛋白的表達(dá)。收集臨床百草

2、枯中毒患者的臨床資料（如血?dú)?、血常?guī)、影像學(xué)等）及血液標(biāo)本，采用高效液相色譜方法檢測(cè)血中百草枯的濃度，同時(shí)檢測(cè)HIF-1α的水平，采用Pearson相關(guān)性分析，明確二者之間的相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　1.百草枯對(duì)細(xì)胞存活率具有濃度依賴性，以60 umol/L時(shí)細(xì)胞存活率為58.21％，因此選擇60 umol/L的百草枯處理24 h作為實(shí)驗(yàn)干預(yù)點(diǎn)。
　　2.與正常組相比，染毒組HIF-1α水平明顯增高（P<0.05）；與

3、染毒組相比，沉默組HIF-1α水平明顯減少（P<0.05）。
　　3.百草枯處理RLE-6TN細(xì)胞后間質(zhì)標(biāo)志物S100A4表達(dá)明顯增加；與百草枯處理組相比，給予HIF-1αsiRNA預(yù)處理后可以明顯減少間質(zhì)標(biāo)志物S100A4的表達(dá)，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.百草枯處理RLE-6TN細(xì)胞后上皮標(biāo)志物ZO-1表達(dá)明顯減少；與百草枯處理組相比，給予HIF-1α-siRNA預(yù)處理后可以明顯增加上皮標(biāo)志物ZO-1的表達(dá)，且差異具

4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5.百草枯中毒患者隨著血中百草枯濃度的升高，HIF-1?的水平也升高，且相關(guān)性分析顯示血漿中百草枯濃度與血清中HIF-1?水平顯著正相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1.在百草枯中毒中，EMT參與了百草枯誘導(dǎo)的早期肺纖維化的進(jìn)程。
　　2.體外抑制HIF-1α表達(dá)后，百草枯所致肺上皮細(xì)胞EMT程度減輕，證實(shí)HIF-1α在百草枯中毒中起到促纖維化作用。
　　3.百草枯中毒患者隨著血中百草枯濃度升高，