慢性高原病患者骨髓有核紅細(xì)胞Bcl-2、Bcl-xl、Bax mRNA表達(dá)研究.pdf

1、目的：慢性高原?。–MS）主要特征之一是紅細(xì)胞過(guò)度積累，是高原地區(qū)常見(jiàn)病，其機(jī)制尚未完全闡明。細(xì)胞凋亡在造血調(diào)控中發(fā)揮重要作用，我們前期研究發(fā)現(xiàn)CMS骨髓造血細(xì)胞凋亡下調(diào)。進(jìn)一步了解CMS患者骨髓有核紅細(xì)胞Bcl-2、Bcl-xl、Bax mRNA表達(dá)情況。探討線粒體信號(hào)途徑中Bcl-2家族在CMS骨髓有核紅細(xì)胞凋亡變化及CMS發(fā)病中的作用。
　　方法：以第六屆國(guó)際高原醫(yī)學(xué)和低氧生理學(xué)術(shù)大會(huì)推薦的CMS診斷標(biāo)準(zhǔn)確診的26例CMS患

2、者為研究對(duì)象，平均年齡（50.2±11.4）歲，同時(shí)以12名海拔相近地區(qū)世居健康體檢者為對(duì)照組，平均年齡（48.5±12.6）歲，上述研究對(duì)象均為男性，排除心、肺、肝、腎疾病。通過(guò)骨髓穿刺術(shù)采集研究對(duì)象骨髓液，以淋巴細(xì)胞分離液分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞并計(jì)數(shù)。以CD71單克隆抗體標(biāo)記、Annexin V-FITC/PI染色，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD71+細(xì)胞凋亡率。利用免疫磁珠分選法分選CD71+細(xì)胞，提取RNA，利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)Bcl-

3、2、Bcl-xl、Bax mRNA表達(dá)水平，并分析Bcl-2、Bcl-xl、Bax mRNA與CMS主要臨床、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的相關(guān)性。
　　結(jié)果：1.CMS組骨髓有核紅細(xì)胞 Bax mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組下降（0.7067±0.01154 vs1.0006±0.05063，t=13.866，p＜0.001），Bax mRNA表達(dá)兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；2.CMS組Bcl-xl mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組有下降趨勢(shì)（0.

4、8581±0.27270 vs1.0560±0.48004），但兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.114，p=0.338）；3.CMS組 Bcl-2 mRNA表達(dá)水平較對(duì)照組也有下降趨勢(shì)（0.9205±0.14506 vs1.0176±0.2666），但兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.738， p=0.427）；4. CMS組骨髓有核紅細(xì)胞（CD71+細(xì)胞）凋亡率為2.40％，與對(duì)照組骨髓有核紅細(xì)胞（CD71+細(xì)胞）凋亡率2.30%相比，

5、兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.409，p=0.686）；5. CMS患者Hb、有核紅細(xì)胞凋亡率與Bax mRNA間均未發(fā)現(xiàn)明顯的相關(guān)性（p＞0.05）。
　　結(jié)論：1.CMS組Bax mRNA表達(dá)較對(duì)照組下降，說(shuō)明CMS患者的骨髓有核紅細(xì)胞存在促凋亡基因下調(diào)，提示細(xì)胞凋亡可能參與CMS疾病的發(fā)病機(jī)制；2.抗凋亡基因Bcl-xl、Bcl-2 mRNA表達(dá)兩組間差異雖然無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但CMS組有下降趨勢(shì)，需加大樣本量，聯(lián)合應(yīng)用多種檢