三個(gè)攜帶線粒體ND1T3866C突變的中國(guó)漢族Leber遺傳性視神經(jīng)病變家系.pdf

1、溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目：三仝搓董線擅住迦』!蘭墨魚魚g塞變的蟲國(guó)迅筮L星墜叢遺佳性塑益經(jīng)痘變?nèi)Т疝q委員會(huì)主席：受佳祝教援出丕太堂答辯委員會(huì)成員：金蕉金數(shù)援濕刎醫(yī)科太堂自董丕數(shù)拯濕劃醫(yī)抖太堂奎紅智數(shù)攫濕刎醫(yī)型太堂塞|』懸慧教援濕劃醫(yī)科太堂溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文三個(gè)攜帶線粒體NDlT3866C突變的中國(guó)漢族Leber遺傳性視神經(jīng)病變家系中文摘要第一部分中國(guó)漢族Leber遺傳性視神經(jīng)病變患者NDI基因突變頻譜目的1、在全國(guó)范圍內(nèi)

2、收集臨床上診斷為L(zhǎng)eber遺傳性視神經(jīng)病變(Leberhereditaryopticneuropathy，LHON)的家系，并收集359例無(wú)血緣關(guān)系的正常人作對(duì)照。同時(shí)建立臨床和分子遺傳學(xué)資料數(shù)據(jù)庫(kù)。2、提取血樣的全基因組DNA，并對(duì)與LHON相關(guān)的三個(gè)原發(fā)位點(diǎn)(NDlG3460A、ND4G11778A、ND6T14484C)所在區(qū)域進(jìn)行PCR擴(kuò)增、測(cè)序、篩查。3、繪制中國(guó)漢族LHON人群線粒體NDl基因突變頻譜。材料與方法1、通過(guò)與溫

3、州醫(yī)科大學(xué)附屬眼視光醫(yī)院、北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院眼科、河北邢臺(tái)眼科醫(yī)院、福建東南眼科醫(yī)院及河南新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院附屬第三眼科醫(yī)院合作，建立LHON收集網(wǎng)絡(luò)。經(jīng)參與者同意，簽署本課題組制定的知情同意書，采集靜脈血樣35mL，同時(shí)記錄其臨床資料和家系資料。2、對(duì)家系先證者進(jìn)行相關(guān)的眼科臨床檢查，包括利用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)對(duì)數(shù)視力表檢測(cè)視力，俞自萍色覺(jué)圖檢查色覺(jué)，Humphrey視野計(jì)按程序SITA檢查(HumphreyVisualFieldAnalyzerI

4、Ii，SITAStandard)視野，德國(guó)羅蘭電生理儀(RolandConsultRETIportgamma，pattemorflashVEP)檢查視覺(jué)誘發(fā)電位(VEP)以及佳能眼底數(shù)碼彩照(CanonCR645NMfunduscamera)拍攝眼底照片。3、提取所采樣本的全基因組DNA，并設(shè)計(jì)三個(gè)原發(fā)位點(diǎn)和NDl所在區(qū)域的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增、純化和測(cè)序。使用生物軟件包括DNAStar、Chromas、ClustalX等對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行分

5、析，查找線粒體DNA(mitochondrialDNA，mtDNA)突變位點(diǎn)。結(jié)果1、從2013年1月起，我們共收集了144個(gè)LHON家系，檢測(cè)到攜帶3個(gè)原發(fā)位點(diǎn)的家系共109個(gè)，其中ND4G11778A突變家系101個(gè)、NDlG3460A突變家系1個(gè)、ND6T14484C突變家系7個(gè)。2、在病例組中共篩查到162處變異，變異發(fā)生頻率為1695x102／bp；在對(duì)照組中共發(fā)現(xiàn)55處變異，變異發(fā)生頻率為575102／bp。且經(jīng)x2檢驗(yàn)，P