基于磁分選技術(shù)與光譜技術(shù)對(duì)于腫瘤細(xì)胞的分離及檢測(cè).pdf

1、納米材料因具有特殊的的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)因而廣泛被用于物質(zhì)檢測(cè)及生物應(yīng)用領(lǐng)域等方面。在物質(zhì)檢測(cè)方面，納米技術(shù)具有較高的靈敏度和高效性。循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)是存在于外周血中少量的惡性腫瘤細(xì)胞，這些腫瘤會(huì)通過(guò)血液轉(zhuǎn)移至其他器官，而腫瘤的轉(zhuǎn)移是造成患者死亡的主要原因。在早期診斷階段，循環(huán)腫瘤細(xì)胞的診斷可有助于鑒別良性和惡性腫瘤，轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)等預(yù)測(cè)及評(píng)估。因此循環(huán)腫瘤細(xì)胞的早期診斷及治療，對(duì)于患者預(yù)后判斷、療效評(píng)價(jià)及個(gè)體化治療都具有十分重要的意義

2、。免疫磁珠分離技術(shù)是結(jié)合免疫學(xué)的高度特異性與磁珠的磁響應(yīng)性的一項(xiàng)免疫學(xué)技術(shù)。本論文致力于利用合成的納米材料通過(guò)磁分選技術(shù)檢測(cè)及分離循環(huán)腫瘤細(xì)胞。本論文所用的免疫磁珠具有極小粒徑，較好的磁強(qiáng)度以及良好的特異性等特性，以及所制備的拉曼納米粒子具有粒徑小，分散均勻，特異性強(qiáng)，具有將強(qiáng)的拉曼信號(hào)等優(yōu)勢(shì)，結(jié)合熒光技術(shù)及表面增強(qiáng)拉曼技術(shù)等，建立了性能良好的捕獲及分選檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞方法。
　　本論文主要研究工作如下:
　　1.基于磁性免

3、疫磁珠對(duì)循環(huán)腫瘤細(xì)胞的富集及檢測(cè)。本章基于磁分選技術(shù)在腫瘤細(xì)胞分選方面的發(fā)展和應(yīng)用，利用特異性抗體與細(xì)胞表面特異性抗原相結(jié)合，使得循環(huán)腫瘤細(xì)胞和特異性的免疫磁珠特異性結(jié)合，從而在外界磁場(chǎng)的作用下，使得目的細(xì)胞在磁場(chǎng)的作用下從混合細(xì)胞中分離出來(lái)。分離出的細(xì)胞由間接熒光技術(shù)在其細(xì)胞表面連接結(jié)合PE熒光團(tuán)的特異性抗體，并用DAPI染色細(xì)胞核定位細(xì)胞位置。通過(guò)倒置熒光顯微鏡的觀察，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的定量檢測(cè)。本章所選用的目的細(xì)胞為肺癌A54

4、9細(xì)胞，對(duì)照細(xì)胞為MRC-5細(xì)胞。依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示檢測(cè)下限可達(dá)到每毫升三個(gè)A549細(xì)胞，具有較好的靈敏度和檢測(cè)下限。本實(shí)驗(yàn)是利用磁分選技術(shù)及間接免疫熒光技術(shù)雙功能檢測(cè)及分離肺癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞。
　　2.基于磁分離技術(shù)和表面增強(qiáng)拉曼技術(shù)捕獲及檢測(cè)Hela細(xì)胞。本章基于磁分選作用對(duì)腫瘤細(xì)胞的特異性的分選及檢測(cè)，將目的細(xì)胞從混合細(xì)胞中分選出來(lái)，同時(shí)制備了一種可特異性連接到目的細(xì)胞表面的納米粒子AuNPs-MBA-BSA-FA，依據(jù)實(shí)驗(yàn)表征