甲醛對小鼠肝的DNA損傷.pdf

1、近年來，室內(nèi)裝修引發(fā)的環(huán)境污染問題受到了普遍關(guān)注。在眾多的污染物中，甲醛以其來源廣、毒性大、污染水平高、污染時間長等特點，已成為我國最主要的室內(nèi)空氣污染物之一，也是環(huán)境衛(wèi)生領(lǐng)域研究的熱點和難點。本課題探討了甲醛致小鼠肝的DNA損傷作用，藉以探討甲醛的遺傳毒性效應(yīng)及其機(jī)制，為人群健康監(jiān)測提供早期靈敏的生物效應(yīng)標(biāo)志物。研究實驗結(jié)果如下： 1.氣態(tài)甲醛致小鼠肝的DPC效應(yīng)及其修復(fù)本研究分別以不同劑量的氣態(tài)甲醛作為染毒劑對小鼠進(jìn)行染毒

2、，并且用KCl-SDS沉淀法檢測了染毒后小鼠肝的DPC含量。經(jīng)濃度為0.5mg/m3、1.0mg/m3和3mg/m3的氣態(tài)甲醛染毒后，測量小鼠的肝細(xì)胞的DPC含量。結(jié)果顯示經(jīng)0.5mg/m3氣態(tài)甲醛染毒處理后，小鼠肝細(xì)胞的DPC系數(shù)與對照組相比沒有發(fā)生顯著的變化；但是，當(dāng)甲醛濃度升高到1.0mg/m3和3.0mg/m3時，DPC系數(shù)顯著上升，且與對照組相比有顯著性差異(p＜0.01)。該結(jié)果說明氣態(tài)甲醛在低濃度時，不能誘導(dǎo)DPC的形成或

3、者不能顯著誘導(dǎo)DPC的形成，在較高濃度時能夠顯著誘導(dǎo)DPC的形成，且具有明顯的量效關(guān)系。修復(fù)實驗結(jié)果顯示，經(jīng)過3.0mg/m3的氣態(tài)甲醛染毒后，0h組肝細(xì)胞內(nèi)DPC含量與空白組相比明顯增加(p＜0.01)，經(jīng)過6h修復(fù)后，與Oh修復(fù)組相比有顯著性下降(p＜0.01)，但與空白組相比，此時DPC還沒有修復(fù)完全；經(jīng)過12、18和24h修復(fù)后，DPC含量與0h相比有極顯著的下降，24h時DPC含量與空白組相比無顯著差異，但12和18h時DPC

4、含量比空白組更低，且有顯著差異。由此可知，氣態(tài)甲醛誘導(dǎo)生成的DPC在體內(nèi)修復(fù)較快，在12h內(nèi)基本上可以修復(fù)完全，24h內(nèi)可以恢復(fù)至機(jī)體正常水平。 2.液態(tài)甲醛致HepG2細(xì)胞的DPC效應(yīng)及其修復(fù)本研究分別以不同劑量的液態(tài)甲醛作為染毒劑，對人肝癌細(xì)胞系HepG2細(xì)胞進(jìn)行染毒，并且用KCl-SDS沉淀法檢測了染毒后HepG2細(xì)胞的DPC含量。結(jié)果顯示在經(jīng)25μmol/L和50μmol/L液態(tài)甲醛處理后，HepG2細(xì)胞內(nèi)的DPC系數(shù)

5、雖然稍有變化，但是與空白對照組相比無顯著差異。而當(dāng)甲醛濃度上升至75μmol/L及以上時，染毒后細(xì)胞中的DPC系數(shù)出現(xiàn)了極顯著上升(p＜0.01)。該結(jié)果說明液態(tài)甲醛在低濃度時，不能誘導(dǎo)DPC的形成或者不能顯著誘導(dǎo)DPC的形成，在較高濃度時能夠顯著誘導(dǎo)DPC的形成，且具有明顯的量效關(guān)系。修復(fù)結(jié)果顯示，經(jīng)過75μmol/L液態(tài)甲醛染毒HepG2細(xì)胞，染毒結(jié)束6h后，HepG2細(xì)胞DPC水平較染毒結(jié)束時沒有發(fā)生顯著變化，當(dāng)繼續(xù)培養(yǎng)至18h和

6、24h后，細(xì)胞內(nèi)的DPC水平較染毒結(jié)束時發(fā)生了非常顯著的下降(p＜0.01)，且與空白對照組相比無顯著性差異。由此推斷HepG2細(xì)胞在染毒18h和24h后DPC基本修復(fù)至正常水平，該細(xì)胞對DPC的修復(fù)可能主要發(fā)生在12～18h之間。 3.不同濃度的液態(tài)甲醛在不同時間段對小鼠肝DPC的效應(yīng)分別以0.2mg/kg、2mg/kg和20mg/kg甲醛對小鼠進(jìn)行腹腔注射染毒，發(fā)現(xiàn)甲醛染毒完后，6h組肝細(xì)胞內(nèi)DPC含量沒有明顯增加(p＞0

7、.05)，說明沒有顯著產(chǎn)生DPC效應(yīng)。12h或18h組肝細(xì)胞內(nèi)DPC含量明顯增加(p＜0.05、p＜0.01)，說明經(jīng)過液態(tài)甲醛作用12h或18h后，顯著的產(chǎn)生DPC效應(yīng)。24h組肝細(xì)胞內(nèi)DPC與空白組比較沒有顯著差異，說明在18h～24h之間發(fā)生了修復(fù)。 4.甲醛吸入對小鼠肝細(xì)胞的DNA斷裂作用本研究以昆明雄性小鼠作為實驗材料，經(jīng)濃度為0.5mg/m3、1.0mg/m3和3.0mg/m3的氣態(tài)甲醛染毒后，用彗星實驗的方法檢測

8、小鼠的肝細(xì)胞的DNA斷裂情況。結(jié)果顯示：當(dāng)甲醛濃度為0.5mg/m3和1.0mg/m3時，TailDNA％和Tailmoment數(shù)值都比各自的空白對照組高，差異均具有高度顯著性(p＜0.01)。說明在這兩個濃度下甲醛誘導(dǎo)了DNA鏈的斷裂，斷片增多，遷移率高。當(dāng)甲醛濃度進(jìn)一步升高到3.0mg/m3時，TailDNA％與空白組基本保持一致，無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)，而Tailmoment顯著下降且低于空白對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0