多功能樹狀大分子納米載藥體系的構建及其腫瘤治療應用.pdf

1、藥物輸送體系的構建和應用被認為會在不久的將來改變制藥和生物技術產業(yè)現(xiàn)狀。目前基于樹狀大分子構建的納米藥物輸送體系己成為分子藥劑學的一個研究熱點。本課題系以第五代聚酰胺-胺樹狀大分子(generation5 Polyamidoamine dendrimer, G5 PAMAMdendrimer)為藥物載體,構建多種藥物輸送體系用于癌癥治療。不同官能團被共價連接到樹狀大分子表面以改善其生物相容性,并賦予其細胞內定位和靶向輸送藥物功能。不同抗

2、腫瘤藥物通過物理包裹或化學鍵合的方式負載到功能化的樹狀大分子上;功能化樹狀大分子載體和樹狀大分子/藥物復合物的性質及生物醫(yī)學應用得到了詳細研究。
　　 本研究首先將G5 PAMAM樹狀大分子表面分別進行全部乙?；?、全部羥基化或全部羧基化修飾,得到三種衍生物G5.NHAc、G5.NGlyOH和G5.SAH,并分別包裹抗腫瘤藥物阿霉素(DOX),用于研究不同表面修飾基團對樹狀大分子/藥物復合物生物活性的影響。紫外表征結果顯示,對于任

3、一種修飾后樹狀大分子而言,每個樹狀大分子均可負載4-9個藥物分子。多重NMR技術,包括一維NMR和二維NMR核磁分析結果表明,功能化樹狀大分子與藥物的相互作用強度差異可用來解釋載藥復合物的體外藥物釋放速率的不同。MTT分析和細胞形態(tài)觀察結果表明載藥復合物的生物活性僅與藥物DOX有關,其中G5.NHAc或G5.NGlyOH樹狀大分子與藥物DOX相互作用較強,形成的復合物更加穩(wěn)定,可視為較理想的藥物DOX輸送載體;而G5.SAH樹狀大分子與

4、藥物DOX相互作用較弱,形成的復合物不太穩(wěn)定,不適合未來體內抗腫瘤研究開發(fā)。本章結果證明樹狀大分子的表面修飾對構建藥物輸送體系用于治療尤為關鍵。
　　 隨后進一步合成了多功能的樹狀大分子藥物載體。熒光標記物異硫氰酸熒光素(FI)和靶向試劑葉酸(FA)被分別連接到氨基基團上,并通過局部乙酰化或全部乙?；磻泻土薌5 PAMAM樹狀大分子表面的部分或全部剩余氨基基團。紫外和1H NMR等表征結果顯示,成功制備出功能化樹狀大分子藥物

5、載體G5.NHAc、G5.NHAc-FA、G5.NHAc-FI或G5.NHAc-FA-FI。
　　 多功能樹狀大分子G5.NHAc-FA-FI被用來包裹新型抗腫瘤藥物combretastatin A4(CA4),用于藥物緩釋和靶向癌癥治療。研究結果顯示,G5.NHAc-FA-FI/CA4復合物可將疏水性藥物CA4的水溶性從11.8μg/mL提高到240μg/mL。體外釋放動力學研究結果表明該載藥復合物可緩慢持續(xù)釋放藥物CA4。M

6、TT分析和細胞形態(tài)觀察結果均顯示載藥復合物的細胞毒性與相同濃度下的純藥CA4相似;更重要的是該復合物可對葉酸受體過表達的KB細胞靶向選擇并表現(xiàn)出特異性的治療效果。
　　 進一步研究中,抗腫瘤藥物DOX被共價連接到樹狀大分子表面,用于藥物的pH誘導控釋和癌癥靶向治療研究。與物理包裹載藥方式不同的是,本章研究通過化學鍵合載藥方式,具體通過酸敏感的順烏頭酸鍵介導藥物DOX和樹狀大分子的連接,制備出了更加穩(wěn)定的載藥復合物 dendrim