微流控技術(shù)冷凍人微量精子的初步研究.pdf

1、目的:研究微流控技術(shù)封裝海藻酸鈉水凝膠的方法及影響水凝膠大小的因素。探索使用海藻酸鈉水凝膠為載體冷凍保存人類(lèi)微量精子的可行性。
　　方法:將兩個(gè)注射器分別裝入海藻酸鈉溶液和礦物油，連接裝置，通過(guò)分別使用不同管徑微滴生成裝置，調(diào)節(jié)微注射泵流速，觀察液滴大小并收集。收集精液標(biāo)本并處理。將標(biāo)本平均分為4組，分別為A組：使用海藻酸微囊包裹的添加保護(hù)劑玻璃化冷凍組；B組：使用海藻酸微囊包裹的無(wú)保護(hù)劑玻璃化冷凍組，C組：使用海藻酸微囊包裹的慢

2、速冷凍組；D組：傳統(tǒng)慢速冷凍方法。通過(guò)微流控生成水凝膠后分別冷凍保存，24h后復(fù)溫，比較組間精子活率、向前運(yùn)動(dòng)及活動(dòng)力百分比。
　　結(jié)果:1：調(diào)整流速發(fā)現(xiàn)增加水相及油相流速均可減小微球大小。使用240/450尺寸裝置，調(diào)節(jié)微流速分別為水相20μL/min，油相600μL/min可制作直徑200μm左右水凝膠。
　　2：冷凍后四組活動(dòng)率、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率相比冷凍前組活動(dòng)率（63.4±2.7）%，前向運(yùn)動(dòng)精子百分率（53.6±

3、3.8）%有顯著差異（p<0.05）,其中，A組和B組活動(dòng)率分別為（17.5±2.4）%和（18.9±6.7）%，前向運(yùn)動(dòng)精子百分率分別為（12.1±5.3）%和（11.3±5.2）%均低于C組和D組，（p<0.05），其中C組的活動(dòng)率和前向運(yùn)動(dòng)精子百分率和D組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（p<0.05）。冷凍后四組活率，相比冷凍前組（69.7±3.1）%有顯著差異（p<0.05）,其中，A組和B組活率分別為（32.4±5.9）%和（34.3±8.0）