梓醇對(duì)缺血損傷神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用研究.pdf

1、本研究旨在探討梓醇在缺血再灌注細(xì)胞模型中的保護(hù)作用及機(jī)制。 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(pheochromocytomacellline，PC12)是常用的神經(jīng)生物和神經(jīng)化學(xué)研究的細(xì)胞模型。本文以PC12細(xì)胞建立氧糖剝奪(OGD)損傷模型，利用MTT(3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenylterazoliumbromide)法檢測(cè)了梓醇對(duì)缺血損傷的PC12細(xì)胞的保護(hù)效應(yīng)；采用LDH(l

2、actatedehydrogenase)法和熒光染色法，檢測(cè)了梓醇對(duì)細(xì)胞膜的影響。結(jié)果表明梓醇對(duì)損傷細(xì)胞具有明顯的保護(hù)活性，穩(wěn)定了膜結(jié)構(gòu)，保護(hù)細(xì)胞免受損傷。 應(yīng)用生物化學(xué)方法，借助于紫外分光光度儀、熒光酶標(biāo)儀和流式細(xì)胞技術(shù)，觀察梓醇對(duì)PC12細(xì)胞缺血損傷抗氧化酶SOD(superoxidedismutase)、GSH-Px(glutathioneperoxidase)和iNOS酶活性以及脂質(zhì)過氧化物MDA(malondiald

3、ehyde)和ROS含量，線粒體膜電位，P53和Bcl-2蛋白，凋亡通路下游半胱氨酸酶-3(Caspase-3)狀態(tài)的影響。結(jié)果顯示，梓醇可明顯提高SOD和GSH-Px酶活性，降低iNOS酶活性以及MDA和ROS含量，提高Bcl-2蛋白的表達(dá)和線粒體膜電位，抑制P53蛋白的表達(dá)和Caspase-3的活性，表明梓醇保護(hù)機(jī)制可能是提高內(nèi)源性抗氧化酶活力，增加自由基清除，抑制自由基生成，降低自由基的含量，并通過抑制線粒體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑，即

4、通過調(diào)節(jié)線粒體膜上Bcl-2和P53蛋白表達(dá)和線粒體膜電位來實(shí)現(xiàn)的。同時(shí)，梓醇抑制caspase-3的活化，從而抑制了PC12細(xì)胞的凋亡。 為了進(jìn)一步說明梓醇對(duì)缺血誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用，本文采用了皮層神經(jīng)元建立氧糖剝奪(OGD)損傷模型，觀察梓醇對(duì)皮層神經(jīng)元細(xì)胞缺血損傷抗氧化酶SOD、GSH-Px和iNOS酶活性以及脂質(zhì)過氧化物MDA的含量的影響。結(jié)果顯示，梓醇可明顯提高SOD和GSH-Px酶活性，降低MDA含量和iNOS酶