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文檔簡介
1、目的:觀察藏紅花素(Crocin)抑制乳腺癌血管生成作用,初步探討其可能的機(jī)制。
方法:MTT法檢測Crocin對人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231及人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的增殖抑制作用,并篩選出合適的藥物濃度;流式細(xì)胞術(shù)觀察Crocin對MDA-MB-231的細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的影響;Transwell及小管形成實驗檢測Crocin對HUVEC細(xì)胞遷移和小管形成的影響;免疫組化檢測Crocin治療后腫瘤CD34及Ki-
2、67表達(dá)水平的變化。
結(jié)果:MTT結(jié)果表明Crocin對人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231有顯著的增殖抑制作用(P<0.05),其48h的IC50值為5mg/ml;而Crocin作用24h時,對HUVEC細(xì)胞有輕度的增殖抑制作用,但不呈劑量依賴關(guān)系,當(dāng)Crocin作用48h和72h時,其增殖抑制作用明顯增加,呈劑量依賴關(guān)系,其48h的IC50值為5.97mg/ml,IC50的測定為后續(xù)實驗提供藥物濃度參考。流式細(xì)胞術(shù)表明Croc
3、in可誘導(dǎo)MDA-MB-231細(xì)胞的凋亡(P<0.01),還可誘導(dǎo)細(xì)胞阻滯于G2/M期(P<0.01),呈劑量依賴關(guān)系。Transwell及小管形成實驗發(fā)現(xiàn)Crocin在尚未引起細(xì)胞死亡的情況下可抑制HUVEC細(xì)胞遷移(P<0.01)和小管形成(P<0.05),均呈劑量依賴性。皮下移植瘤實驗發(fā)現(xiàn)Crocin5mg/ml組較空白對照組腫瘤組織生長緩慢,腫瘤組織微血管密度(MVD)明顯下降、細(xì)胞增殖明顯減少(P<0.05)。
結(jié)論
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