小鼠-大鼠限制性體位致呼吸功能障礙的初步研究.pdf

1、目的：探討小鼠/大鼠限制性體位致呼吸功能障礙及其類型，并初步探討其發(fā)生機(jī)制，為法醫(yī)學(xué)實(shí)踐和臨床診療工作提供一定實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：建立小鼠多種限制性體位，觀察小鼠在不同限制性體位下的死亡時(shí)間分布，探索合適的限制性體位導(dǎo)致窒息的嚙齒類動物模型；復(fù)制大鼠限制性體位模型，實(shí)驗(yàn)分為對照組（C組）、限制體位6h組（R6h組）和限制體位12h組（R12h組）；檢測大鼠的血?dú)夥治?，判斷酸堿平衡紊亂變化；應(yīng)用透射電鏡技術(shù)和組織病理方法觀察肺組織、

2、膈肌的超微結(jié)構(gòu)及組織病理學(xué)改變；應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)和免疫印跡法檢測膈肌iNOS蛋白表達(dá)變化。 結(jié)果： 1．小鼠不同限制性體位的死亡時(shí)間分布 （1）四肢和頸部固定、仰臥位：存活24h以上； （2）前肢胸前交叉、后肢和頸部固定、仰臥位：10min左右死亡； （3）前肢背后交叉、后肢和頸部固定、仰臥位：存活24h以上； （4）四肢和頸部固定、胸背部墊高、仰臥位：死亡時(shí)間分布于12h～60h之間

3、，平均為32．55±15．23h； （5）后肢和頸部固定、胸背部墊高、仰臥位及前肢懸掛標(biāo)準(zhǔn)重物：采用前肢懸掛標(biāo)準(zhǔn)重物的方法，保證了限制程度的持續(xù)性和一致性。1）在前肢分別懸掛100g、125g、150g標(biāo)準(zhǔn)重物時(shí)，小鼠（鼠齡8～10周）死亡時(shí)間分別為24．47±5．77h、21．8±3．07h、8．16±3．44h（與前兩組分別比較，死亡時(shí)間明顯縮短P<0．01）；2）在前肢分別懸掛100g、125g標(biāo)準(zhǔn)重物時(shí)，小鼠（鼠齡5～6

4、周）死亡時(shí)間分別為16．18±6．29h、10．08±7．12h；在前肢懸掛100g標(biāo)準(zhǔn)重物時(shí)，鼠齡5～6周的小鼠死亡時(shí)間主要分布在12h～24h之間，死亡率為75．26％。3）在前肢懸掛125g標(biāo)準(zhǔn)重物時(shí)，小鼠（鼠齡8～10周）和小鼠（鼠齡5～6周）死亡時(shí)間分別為21．8±3．07h、10．08±7．12h（與前者比較，死亡時(shí)間明顯縮短P<0．01）。 2.大鼠限制性體位的血?dú)夥治鲎兓?（1）血液pH變化：C組pH為7

5、．36±0．02，R6h組、R12h組pH分別為7．16±0．04、7．06±0．07，與C組比較，明顯降低（P<0．01）。R12h組pH比R6h組明顯降低（P<0．05）。 （2）血液PaCO2變化：C組PaCO2為50．67±3．98mmHg，R6h組、R12h組PaCO2分別為71．50±11．41mmHg、88．5±8．78mmHg，與C組比較，明顯升高（P<0．01）。R12h組PaCO2比R6h組明顯升高（P<0．

6、05）。 （3）血液PaO2變化：C組PaO2為93．67±8．91mmHg，R6h組、R12h組PaO2分別為90．17±8．11mmHg、78．20±4．07mmHg，與C組比較，R6h組PaO2呈降低趨勢，與R6h組比較，R12h組PaO2明顯降低（P<0．05）。 （4）血液HCO3—變化：C組HCO3—為28．27±1．58mmol/L，R6h組、R12h組HCO3—分別為25．68±2．28 mmol/L、2

7、5．76±2．17mmol/L，與C組比較，明顯降低（P<0．05）。與R6h組比較，R12h組HCO3—無明顯變化（P>0．05）。 3. 大鼠限制性體位致肺臟、膈肌形態(tài)變化 （1）與C組比較，R6h組、R12h組大鼠肺臟的主要組織病變有，局部肺泡腔狹小、肺泡隔增寬，可見炎癥細(xì)胞浸潤；電鏡下見肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞嗜鋨板層小體減少，微絨毛脫失，線粒體空泡樣改變，呼吸膜增厚； （2）與C組比較，R6h組、R12h組大鼠

8、膈肌主要組織病變有，局部肌纖維排列扭曲、溶解斷裂，肌間隙增寬；電鏡下肌原纖維斷裂，肌間隙增寬，肌絲排列紊亂；線粒體腫脹、增多呈串珠狀排列。 4. 大鼠限制性體位致膈肌iNOS蛋白表達(dá)在本實(shí)驗(yàn)條件下，C組、R6h組、R12h組膈肌中均未檢出iNOS蛋白表達(dá)。 結(jié)論： 1．通過觀察小鼠多種限制性體位引起的死亡時(shí)間分布，確立了胸廓活動限制、仰臥位、后肢和頸部固定、前肢懸掛標(biāo)準(zhǔn)重物的強(qiáng)迫體位為嚙齒類動物限制性體位窒息的合