東北虎（Panthera tigris altaica）電刺激采精及凍融前后精子超微結構研究.pdf

1、東北虎是國家一級保護動物，我國現(xiàn)存野生東北虎的數(shù)量很少，而人工圈養(yǎng)的東北虎又存在近親繁殖的現(xiàn)象。對東北虎的精液進行超低溫冷凍保存研究，為將來建立精液的種質資源庫，通過人工授精在圈養(yǎng)虎和野生虎之間進行基因交流，避免近親繁殖造成的種群退化，增加虎基因的多樣性，對于更加有效的保護東北虎具有十分重要的意義。 本研究對17只東北虎進行了23次電刺激采精，并對取得精液進行品質分析。結果表明，不同虎個體對電刺激采精的電壓敏感度不同，在平均電壓

2、為4.78±1.3伏時射精。所采集精液量平均為4.02±1.18mL，pH值為7.05±0.26，精子密度為23.43±33.87×10<'6>個 mL，精子活率為62.9±19.96％，畸形率為45.06±14.96％。從總體上看12月份和1月份采精效果最好，有精率占全年的57.2％，10月和11月的采精效果最差，無精率占全年的44.4％，表明東北虎精液品質受季節(jié)影響。 通過比較果糖和葡萄糖兩種冷凍稀釋液對精子的保護情況，發(fā)現(xiàn)

3、果糖冷凍稀釋液對虎精子的保護效果較好，凍融后精子活率達到58.85％，畸形率為58.88±11.88％，頂體完整率為82.43±4.04％；葡萄糖冷凍稀釋液，解凍后精子活率為13.83％，畸形率為13.1±17％，頂體完整率為83.1±8.3％。 用掃描電鏡和透射電鏡對東北虎精子形態(tài)和結構的觀察表明，東北虎精子全長12.57±1.25μm，可分為頭部和尾部。在頭部和尾部頸段處及尾部中段前方常見原生質，內含線粒體。頭部：正面呈圓形

4、長約為3.98±0.5μm；寬約3.41±0.5μm。頸段：頸段是連接頭部和尾部的結構，頸段較短0.66±0.106μm，內含中心粒和節(jié)柱。中段：長3.627±1.166μm，由線粒體包圍，線粒體為31-34旋，軸絲為常見的“9+2”結構。主段和末段長39.31±1.25μm。 冷凍對于精子損傷主要表現(xiàn)在質膜和線粒體，而這些變化會在不同程度上引起受精率的下降。精子在凍融過程中質膜易發(fā)生膨脹或斷裂、頂體囊泡化或潰散，而質膜和頂體丟