不同pH水平下兩種菌根真菌對(duì)紫云英生長的影響及其相互作用.pdf

1、AM真菌(arbuscular mycorrhizal fungi)在自然界分布極其廣泛，能在許多類型的土壤中存活，80％的陸生植物可以和AM真菌共生。土壤的肥力、水分、pH、環(huán)境的光照條件、溫度等因素都會(huì)影響菌根真菌與植物的共生效應(yīng)。不同的因素會(huì)影響AM真菌的侵染率、產(chǎn)孢量以及菌根效應(yīng)。本論文以AM真菌為研究對(duì)象，探討了不同pH下(4.3、5.1、5.8、6.8)，兩種VA菌根真菌Glomus mosseae，Gigaspora ma

2、rgarita單接種及混合接種對(duì)紫云英生長的影響以及兩者之間的相互作用。 采用Trouvelot等(1986)的方法進(jìn)行曲利苯藍(lán)(Trypan blue)染色，根據(jù)染色結(jié)果侵染點(diǎn)和侵染結(jié)構(gòu)的多少，將AM真菌的侵染率分為0、1、2、3、4、5六個(gè)等級(jí)，侵染強(qiáng)度分為A<,0>、A<,1>、A<,2>、A<,3>四個(gè)等級(jí)，用“MYCOCALC”軟件計(jì)算了宿主根系菌根侵染強(qiáng)度，記為M％。同時(shí)參考Zhao et al.(1997)的組織染

3、色法，檢測在不同pH條件下琥珀酸脫氫酶(SDH)和堿性磷酸酶(ALP)的活性。通過對(duì)紫云英地上和地下部分生物量的測定，結(jié)果表明紫云英的生長效應(yīng)與VA菌根真菌的侵染率及兩種酶活成明顯相關(guān)性。土壤pH升高，單接種Glomus mosseae和混合接種時(shí)的侵染率和酶活隨之升高；而單接種Gigaspora margarita的侵染率和酶活則呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢，在pH5.8時(shí)達(dá)到最大值。同時(shí)根據(jù)根外菌絲長度的測量(Miller,Jastro

4、w et al.2000)，揭示了菌根真菌的侵染率與根外菌絲密度的關(guān)系。 通過對(duì)AM真菌核糖體基因25SrDNA的D1-D2高度可變區(qū)的序列分析，設(shè)計(jì)了特異性擴(kuò)增Glomus mosseae和Gigaspora margarita的引物gml和gigl，能夠從AM真菌混合侵染的植物根系中特異性檢測出相應(yīng)的真菌。在混合接種實(shí)驗(yàn)中，利用所設(shè)計(jì)的特異性引物進(jìn)行nested PCR，擴(kuò)增結(jié)果顯示：在低pH水平下(4.3-5.1)，大多數(shù)

5、根段為Gigaspora margarita所侵染，在高pH水平下(5.8-6.8)，Glomus mosseae表現(xiàn)出較強(qiáng)的競爭力，但并沒有檢測到兩種VA真菌存在于同一條侵染根段；對(duì)比單接種實(shí)驗(yàn)，在低pH水平下，Glomus mossede顯著抑制了Gigaspora margarita的侵染，而在高pH水平下Gigaspora margarita明顯促進(jìn)Glomus mosseae的侵染。分子探針及嵌套PCR技術(shù)的使用，揭示了AM真