山茶花降血脂、抗氧化功能及有效成分分析.pdf

1、本文以山茶花花瓣和葉片為試驗(yàn)材料，利用95％乙醇回流提取，提取物水溶后以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水飽和正丁醇依次萃取，獲得5種萃取物，比較研究這5種萃取物的降血脂及抗氧化能力，并分析其有效成分。以樣品體外結(jié)合三種膽酸鹽的能力作為權(quán)衡其降血脂效果的指標(biāo);以樣品清除DPPH·、·OH的能力以及還原力的大小作為考察其抗氧化活性的指標(biāo)。經(jīng)相關(guān)性分析，萃取物的降血脂和抗氧化功能與其所含的多酚、黃酮具有顯著正相關(guān)性;再通過LC-MS進(jìn)一步分析表明，

2、兒茶素和表兒茶素可能是山茶花降血脂、抗氧化功能的主要活性成分。并取得以下主要研究結(jié)果:
　　1、經(jīng)回流提取，蒸發(fā)濃縮后得浸膏，由此可計(jì)算出山茶花花瓣5種萃取物得率分別為:乙酸乙酯萃取物1.210％、正丁醇萃取物1.701％、石油醚萃取物0.790％、氯仿萃取物0.187％、蒸餾水萃取物0.330％。山茶花葉片5種萃取物得率分別為:乙酸乙酯萃取物6.058％、正丁醇萃取物6.631％、石油醚萃取物0.362％、氯仿萃取物1.733％

3、、蒸餾水萃取物1.904％。
　　2、降血脂研究:膽酸鹽的測定采用紫外分光光度法，三種膽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2分別為?；悄懰徕c0.9953，甘氨膽酸鈉0.9969，膽酸鈉0.9989，并且該測定方法的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性都比較好。在體外模擬人體胃液消化環(huán)境條件下，以降血脂藥物的主要成分考來烯胺作為對(duì)照，分別比較了5種萃取物在體外胃環(huán)境下結(jié)合三種膽酸鹽的能力。結(jié)果表明，山茶花花瓣各萃取物降血脂能力整體比葉片強(qiáng)，花瓣各萃取物中乙酸乙酯萃取物活性

4、最強(qiáng)，降血脂能力最好，其次是正丁醇萃取物;花瓣乙酸乙酯和正丁醇萃取物結(jié)合?；悄懰猁}、甘氨膽酸鈉和膽酸鈉的效果依次是同劑量考來烯胺的84.44％和71.33％、60.99％和54.14％、96.95％和70.29％。
　　3、抗氧化研究:選取清除DPPH·和·OH的能力以及還原力大小來評(píng)判山茶花抗氧化效果。結(jié)果表明，山茶花花瓣各萃取物中清除自由基能力最強(qiáng)的是乙酸乙酯和正丁醇萃取物，均表現(xiàn)出良好的體外抗氧化活性;在試驗(yàn)濃度梯度內(nèi)，清除

5、率隨溶液濃度的增大而升高，呈劑量效應(yīng)關(guān)系;清除DPPH·能力最強(qiáng)的是花瓣正丁醇和乙酸乙酯萃取物，當(dāng)樣品的濃度達(dá)到200μg/mL時(shí)，花瓣正丁醇和乙酸乙酯萃取物清除DPPH·能力分別為93.31％和83.71％;葉片正丁醇和乙酸乙酯萃取物清除DPPH·能力分別為76.61％和61.01％。對(duì)·OH的清除能力上，發(fā)現(xiàn)低濃度時(shí)對(duì)·OH清除率大于Vc，高濃度時(shí)小于Vc，隨著萃取物濃度的增大，清除率漲幅緩慢。山茶花花瓣和葉片對(duì)鐵離子均具有一定的還

6、原能力，且隨著樣品濃度的增大而增大，還原能力呈劑量效應(yīng)關(guān)系;在相同濃度下，山茶花花瓣各萃取物的還原能力是葉片的2～3倍。
　　4、主要成分測定結(jié)果表明:山茶花花瓣正丁醇萃取物中多酚、黃酮含量分別為27.92％、39.56％，乙酸乙酯萃取物中多酚、黃酮含量分別為32.32％、33.16％;山茶花葉片正丁醇萃取物中多酚、黃酮含量分別為11.64％、21.53％，乙酸乙酯萃取物中多酚、黃酮含量分別為10.43％、13.16％。山茶花花瓣

7、和葉片降血脂、抗氧化活性最強(qiáng)的正丁醇和乙酸乙酯萃取物中多酚和黃酮的含量明顯高于其它三種萃取物，經(jīng)相關(guān)性分析表明，多酚和黃酮含量與降血脂、抗氧化功能均呈顯著性正相關(guān)(P＜0.05)。
　　5、活性成分分析結(jié)果:通過LC-MS和HPLC分析表明，山茶花花瓣正丁醇和乙酸乙酯萃取物中都可能含有兒茶素和表兒茶素，正丁醇萃取物中兒茶素、表兒茶素含量分別達(dá)11.72％、31.37％;乙酸乙酯萃取物中兒茶素、表兒茶素含量分別達(dá)7.65％、52.1